基于线粒体全序列的特异性PCR法鉴定哈蟆油的研究

目录

声明

第1章 哈蟆油的研究与应用概况

1.1 研究概况

1.1.1 生物活性研究

1.1.2 化学成分研究

1.1.3 基源研究

1.2 应用概况

1.3 立题依据

1.3.1 哈蟆油的常见混伪品

1.3.2 哈蟆油的质量控制方法

1.3.3 分子鉴定技术

1.3.4 立题依据

第2章 线粒体全基因序列的生物信息分析

2.1 材料与方法

2.1.1 7个物种的线粒体全基因序列获取

2.1.2 基于线粒体全基因序列的系统进化树的建立

2.1.3 近源物种的COI、Cyt b和12S rRNA基因多序列比对

2.1.4 近源物种的线粒体全基因序列比对

2.2 实验结果

2.2.1 7个物种线粒体全基因序列的特征分析

2.2.2 基于线粒体全基因序列的系统进化树分析

2.2.3 近源物种的COI、Cyt b和12S rRNA基因多序列比对

2.2.4 近源物种的线粒体全基因序列比对

2.2.5 ND5和ND6基因间隔序列分析

2.3 讨论

第3章 哈蟆油特异性PCR鉴定方法的建立

3.1 材料、试剂和仪器

3.1.1 动物样本及药材

3.1.2 试剂

3.1.3 仪器

3.2 实验方法

3.2.1 引物设计

3.2.2 基因组DNA的提取

3.2.3 PCR扩增反应

3.2.4 琼脂糖凝胶电泳

3.2.5 PCR产物测序

3.2.6 长白山地区哈蟆油的基源分析

3.3 实验结果

3.3.1 琼脂糖凝胶电泳结果分析

3.3.2 测序结果与分析

3.4 讨论

3.4.1 特异性PCR鉴定方法与药典质量控制方法的比较

3.4.2 哈蟆油的其他鉴定方法

3.4.3 哈蟆油的特异性PCR鉴定方法

第4章 哈蟆油定量分析方法的建立

4.1 实验材料、试剂和仪器

4.1.1 材料

4.1.2 试剂

4.1.3 仪器

4.2 实验方法

4.2.1 对照样品的制备及基因组DNA的提取

4.2.2 引物设计

4.2.3 实时荧光定量PCR反应

4.2.4 引物特异性

4.2.5 标准曲线的建立

4.3 实验结果

4.3.1 DNA质量鉴定结果

4.3.2 引物特异性结果分析

4.3.3 对照样品制备预实验结果分析

4.3.4 标准曲线的制备

4.4 讨论

第5章 结论

参考文献

作者简介及在学期间所取得的科研成果

致谢