兔眼蓝莓组织培养技术的研究

摘要

蓝莓果实营养丰富，具有独特保健价值和营养价值，作为本世纪极具有发展潜力的一个新兴树种，大规模发展蓝莓产业势在必行。但由于其材料来源有限，繁殖系数低，无法实现规模化生产，组织培养是解决这一问题的重要途径。本论文以蓝莓品种“粉蓝”的茎段为外植体，研究蓝莓最适消毒措施及基础培养基、优化离体体培养和生根体系、练苗移栽相关问题，此外，还探讨了蓝莓在组培过程中易褐化这一难题，主要研究结果如下：
　　 (1)外植体在75％酒精浸泡2min后转至0.1%升汞浸泡10min，之后用无菌水冲洗6次可达到理想的灭菌状况，其污染率降低为最低(15%)，愈伤率达到85%，且愈伤和侧芽生长均良好，为蓝莓适宜的灭菌方法。
　　 (2)改良WPM培养基中“粉蓝”的长势最好，60d后分化的不定芽数量达到6.2个，鲜物重和干物重分别可达到86.1 mg和19.1mg。
　　 (3)ZT和NAA配合使用能有效促进蓝莓芽和愈伤组织的诱导和分化，此时愈伤组织出现早，芽分化快且粗壮，侧芽生长旺盛，诱导率高。在改良WPM+ZT2.0mg/L+NAA0.2 mg/L的培养基中，最适宜蓝莓的增殖生长，其诱导率高达82%。
　　 (4)蓝莓继代培养试管苗在加入了0.2mg/L IBA，并添加含活性炭200-500mg/L的改良1/2WPM的培养基中生根情况最为理想想，暗培养17d左右有根发生，培养30 d转光培养60d后观察生根率高达86.9%。
　　 (5)当培养基中加入Vc液并在活性炭含量100mg/L-200mg/L时，能有效防止外植体褐化发生；当培养基中加入Vc液并在含活性碳200mg/L-500mg/L时，有效防止愈伤组织褐化发生。研究为克服蓝莓初代培养时外植体及初代形成的愈伤时极易出现的褐化现象提供依据。
　　 (6)秋季将“粉蓝”组培苗经过锻炼后移栽，将其根部迅速蘸取500mg/LIBA植入1:1的腐苔鲜和珍珠岩中，可获得80%以上的存活率和6cm以上的平均生长高度。