蝴蝶兰“'V31”高效繁殖体系的建立及复合新型防褐化天然添加物的筛选

摘要

蝴蝶兰是目前广受喜爱的高档花卉之一,我国产6种。图案多变的花瓣、颜色纷繁的花色、厚实鲜亮的叶片、姿态万千的花梗都是主要的观赏部位。每年作为年宵花卉和切花材料有着大量的市场需求,且新品种的繁育速度越来越快,而在实际的培育过程中又面临着如下问题:一是大量繁殖受到限制,产量远远小于需求量;二是生长周期较长,对于供应时间的需求较难满足;三是粗放的培育模式下,母本的优良性状很难保持;四是组培过程中传统的防止褐化的手段过于单一,且效果有限;五是在培育过程中方法单一,往往是一条途径,导致最终没有高质高量的植株供应市场。因此,大量工厂化生产仍然是每个品种亟待解决的问题。
　　本文以蝴蝶兰“V31”为材料,首先从不同的两条组织培养主线入手:在寻求快速繁殖体系的同时完善整个组织培养体系。以花梗腋芽为外植体直接分化丛生芽再生根筛选出最佳的快速繁殖体系,在缩短培育时间的同时还筛选丛生芽增殖的最适培养基,满足大量繁殖的需求;以叶片、花梗切片、后期组培苗的嫩叶和茎尖为外植体经过原球茎的诱导与增殖,再分化并增殖丛生芽,最后生根得到完整的组织培养体系。与此同时,利用植物自身生化特性,本着绿色环保的理念找到新的可以替代传统防褐化的方法。获得以下结果:
　　(1)全交试验设计筛选出蝴蝶兰“V31”品种的最佳消毒方案是:前期洗涤和流水处理后置于超净工作台中,花梗和花梗切片用70％酒精(V:V)浸泡25s,0.2%HgCl2(含有0.1%的吐温20)处理11min,无菌水冲洗后,接种;叶片用70%酒精(V:V)浸泡15s,0.1%HgCl2(含有0.1%的吐温20)处理14min,无菌水冲洗,接种,同时在前期处理时后者较前者洗涤剂浸泡时间减半,流水冲洗时间缩短为0.5h。
　　(2)建立蝴蝶兰“V31”品种的快速繁殖体系,筛选出各阶段最适培养基配方。采用4因素3水平的正交试验设计筛选诱导丛生芽阶段最适培养基为:MS+8.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA+15g/L椰子粉;丛生芽增殖阶段最适培养基为:MS+10mg/LKT+0.6mg/LNAA+0.2mg/L2,4-D;生根壮苗阶段最适培养基为:1/2MS+0.1mg/LNAA+1mg/L6-BA+20g/L蔗糖+10g/L香蕉粉。
　　(3)以金盏花提取液,柠檬提取液,西红柿提取液,迷迭香汁为天然添加物,设置3个浓度梯度,结合MS、B5、N6基本培养基全交试验设计筛选出添加物抑制褐化最佳浓度,完善蝴蝶兰“V31”组织培养体系。
　　(4)完善蝴蝶兰“V31”组织培养体系,采用4因素6水平的均匀试验设计筛选诱导增殖原球茎的最佳培养基:N6+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+150mg/L柠檬酸+12g/L香蕉粉;原球茎分化丛生芽最佳培养基:选用快繁体系中的最适培养基,但是培养条件不同,光照时间减半,光强不变,光照6h的苗分化率大于光照12h的苗;生根壮苗阶段培养基和快繁体系中相同。筛选出优化的栽培基质:经过0.1%高锰酸钾浸泡0.5h的水苔+玉米棒。本实验建立的“V31”快速繁殖体和完整的组织培养体系,为今后生产出高质高量的本红花品种提供依据,同时对于天然添加物抑制褐化的探究为今后对防褐化的研究提供了新的出发点,提出了新的研究构思。对今后组织培养的研究有现实意义。

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1 文献综述

1.1 蝴蝶兰的形态特征和习性

1.2 历史上的蝴蝶兰的生产和栽培

1.3 蝴蝶兰繁殖方法研究进展

1.4 蝴蝶兰组织培养过程中褐化问题研究

1.5 蝴蝶兰栽培基质研究现状

1.6 蝴蝶兰组织培养前景

2 引 言

2.1 本课题的研究意义

2.2 本研究的内容、目标

3 材料和方法

3.1 实验材料

3.2 实验方法

4 结果与分析

4.1 蝴蝶兰快速繁殖体系和组织培养体系的建立

4.2 天然添加剂对褐化的抑制

5 结论与讨论

5.1 结论

5.2 讨论

参考文献

附录A

附录B

致谢

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