miR-224-5p沉默PCSK9对HepG2细胞脂质摄取的影响

目录

声明

第1 章 绪 论

1.1 PCSK9的结构与功能

1.2 PCSK9与LDLR的研究进展

1.3 PCSK9抑制剂的种类

1.4 MicroRNAs的生物合成及其作用机制

1.5 MicroRNAs与脂质代谢

第2 章实验材料

2.1 细胞和主要试剂

2.2 主要仪器设备

第3 章实验方法

3.1常用试剂的配制

1) 冷冻保护剂配制

2) PBS 溶液配制

3) 4%多聚甲醛配制

4) 1×SDS-PAGE 电泳液配制

5) 1×转膜液的配制

6) TBST 配制

7) 5%封闭液配制

8) 0.5%油红O 储存液配制

3.2 细胞培养

3.2.1 细胞复苏

3.2.2 细胞传代

3.2.3 细胞冻存

3.3细胞转染

3.4 双荧光素酶报告基因分析

3.5 蛋白质印迹法-Western blot

3.5.1 贴壁细胞蛋白质提取

3.5.2 SDS-PAGE凝胶配制

3.5.3 电泳

3.5.4 转膜（湿转法）

3.5.5封闭、抗体孵育与ECL化学发光检测

3.6细胞免疫荧光

3.7细胞脂内吞

3.8 油红O染色

3.9生物信息学靶标分析网站

3.10 统计分析

第4章实验验结果

4.1.3 miR-224-5p与PCSK99 mRNA 3′UTR结合自由能能分析

4.2 双荧光素酶报告基因检测miR-224-5p与 PPCSK9 m RRNA 3′UTR的结合情况

4.3 miR-224-5p对HepG2细胞PCSK9表达的影响

4.4 miR-224-5p对HepG2细胞LDLR的调控

4.5 miR-224-5p对HepG2细胞内的脂滴含量的影响

4.6 miR-224-5p对HepG2脂质摄取能力的影响

第5 章 讨 论

第6 章 结 论

参考文献

主要英文缩略词索引

综述:Functional regulatory roles of microRNAs in atherosclerosis

攻读学位期间的科研成果

课题资助

致 谢