梨树种质资源酚类物质鉴定及其与腐烂病抗性关系研究

摘要

为研究46份梨树种质资源枝干韧皮部组织中的主要酚类物质，采用了高效液相色谱（HPLC）和液相色谱—串联质谱方法（LC-MS/MS）对上述资源枝干韧皮部位酚类物质的各组分进行定性和定量分析。在此基础上，应用SPSS软件，对46份资源枝条发病程度与酚类物质各组分含量进行相关性分析。同时，选择抗病效果差异明显的品种进行腐烂病原菌接种，并对接种前后相关酚类组分含量变化进行分析。
　　研究主要结果如下：
　　（1）通过优化，确定最佳液相分离条件为：以甲醇+0.1％甲酸—水+0.1%甲酸溶液为流动相作梯度洗脱，柱温30℃，检测波长280 nm，流速为0.4 mL/min，样品中的酚类物质在90 min内得到分离；UPLC-MS/MS质谱条件：ESI检测器，负离子采集模式，质谱采集范围m/z100到2000，干燥气流速6 L/min，干燥气温度350℃，雾化气压力45 psi，毛细管电压3500 V。
　　（2）鉴定出梨树种质资源枝干中44种酚类物质，主要酚类物质是熊果苷，在臭盖子中含量高达1060 mg/g FW，臭盖子属于秋子梨，其次为绿原酸，在半斤酥中含量高达640 mg/L，半斤酥属于白梨。除此之外，含量较高的有儿茶素、表儿茶素等。应用SPSS软件进行相关性分析，发现砂梨中原儿茶素、儿茶酚、儿茶素与腐烂病抗性相关，白梨中熊果苷、没食子酸与腐烂病抗性相关，秋子梨中p-香豆奎尼酸、槲皮素糖苷、柚苷与腐烂病抗性相关，新疆梨中熊果苷、香草酸糖苷、绿原酸与腐烂病抗性相关，西洋梨中没食子酸、p-香豆酸、阿魏酰奎尼酸与腐烂病抗性相关。
　　（3）选择茌梨、秋白、豆梨和杜梨这四个抗病效果差异明显的品种进行腐烂病菌接种，发现秋白中熊果苷、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、槲皮素糖苷、根皮苷的含量变化明显，且腐烂病菌接种12 h后枝条内酚类物质含量小于接种0 h和48 h；茌梨接种48 h后熊果苷、儿茶素、表儿茶素相比较12 h明显上升，绿原酸变化不明显，根皮苷下降明显；豆梨接种48 h后熊果苷、绿原酸、肉桂酸相比较12 h下降明显，表儿茶素、槲皮素糖苷、根皮苷含量明显上升，异鼠李素葡萄糖苷、儿茶酚、儿茶素变化不明显；杜梨在腐烂病菌接种后，熊果苷、异鼠李素葡萄糖苷、儿茶酚、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、槲皮素糖苷、根皮苷、异鼠李素-3-o-芸香糖苷、肉桂酸的含量均有明显的上升，但接种12 h和48 h变化不明显。

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1.文献综述

1.1梨概述

1.2腐烂病概述

1.3植物多酚概述

1.4梨多酚概述

1.5 高效液相色谱法概述

1.6 课题的提出

2 引 言

2.1 研究目的及意义

2.2 研究内容

2.3.技术路线

3 材料与方法

3.1 材料

3.2 仪器与试剂

3.3 方法

4 结果与分析

4.1 酚类物质鉴定HPLC条件

4.2 酚类物质HPLC鉴定

4.3 酚类物质质谱定性分析

4.4 酚类物质与腐烂病抗性相关性分析

4.5 病原菌接种后相关酚类组分变化

5 讨 论

5.1植物酚类物质鉴定结果

5.2植物酚类物质与抗病性表现

5.3 梨树不同种类品种间对腐烂病的抗性差异

6 结 论

参考文献

附录A

附录B

致谢

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