复骨健步片对兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡影响的实验研究

摘要

1．目的： 观察复骨健步片对兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响，进而探讨复骨健步片治疗膝骨性关节炎的机制。 2．方法： 将48只家兔随机分为4组：A为正常对照组，B为模型组，C为壮骨关节九组，D为复骨健步片组，每组12只，B、C、D组经石膏外固定左后肢膝关节于伸直位6周，建立骨性关节炎动物模型，模型建立1天后即采用灌胃法给药，A组、B组予生理盐水10ml，C组予壮骨关节丸生理盐水溶液10ml(0.75 6g)，D组予含复骨健步片生理盐水溶液10ml(0.568g)，均为10ml/日，2次/日。于造模后2、4、6周处死实验兔，每次每组4只。切取关节软骨，分别进行观察：(1)．原位末端标记法(TuNEL)观察细胞凋亡及计数；(2)．免疫组化法(即用型sABC)检测Bcl-2、Bax基因的表达水平。 3．结果： (1)．TuNEL法检测兔膝关节软骨细胞凋亡：造模后第2周， C、D二组显著低于B组(P<0.01)且二组间无显著差异；造模后第4、6周，B、C、D三组凋亡率显著高于A组(P<0.01)，D组显著低于B、C组(P<0.01)。对D组第2、4、6周前后之间两两比较均有显著性差异(P<0.01)。 (2)．细胞凋亡抑制基因(Bcl-2)表达水平的检测：造模后第4、6周，D组表达水平显著高于B、C组，低于A组，差异有显著性意义(P<0.01)。 (3)．细胞凋亡促进基因(Bax)表达水平的检测：造模后第4周，D组表达水平显著低于B、C组(P<0.01)；造模后第6周D，C组间Bax表达无统计学意义(P>0.05)。 4．结论： (1)．复骨健步片可以明显地降低骨关节炎中软骨细胞的凋亡率，从而起到保护软骨细胞，延缓发病的目的。 (2)．复骨健步片降低骨关节炎中软骨细胞的凋亡率可能与该药抑制骨关节炎中Bax的表达促进Bcl-2的表达有关。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

材料和方法

1.实验材料

1.1动物

1.2药物

1.3仪器设备

1.4主要试剂

2.实验方法

2.1动物分组

2.2动物造模

2.3造模评价

2.4实验步骤

3.观察项目及检测方法

3.1原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡及计数

3.2免疫组化法检测Bax、Bcl-2表达水平(即用型SABC)

4.数据的统计和处理

结果与分析

1.造模前家兔体重均衡性比较

2.原位末端标记法(TUNEL)检测

2.1各组软骨细胞凋亡率比较

3.细胞凋亡相关基因检测

3.1细胞凋亡基因(Bcl-2)表达水平的检测

3.2促进细胞凋亡基因(Bax)表达水平的检测

3.3 Bcl-2/Bax值的变化

讨论

1骨关节炎与软骨细胞凋亡

2.骨关节炎的中医药治疗

2.1祖国医学对本病的认识

2.2现代中医对本病的研究进展

3.Bcl-2/Bax的表达与细胞凋亡

4.复骨健步片治疗骨关节炎的机制探讨

4.1.复骨健步片组方原理

4.2.组方药物的现代药理学研究

结 论

致 谢

参考文献

附 录

综述