几种虫生真菌对菜青虫的致病力及作用机制初探

摘要

本研究收集了4个绿僵菌菌株和5个白僵菌菌株，依据菌株的生长速度、产孢量、初始产孢时间及孢子萌发率等基本生物学性状进行初步筛选，并采用喷雾法对4龄菜青虫进行毒力测定，利用时间-剂量-死亡率模型对实验数据进行模拟分析，揭示供试昆虫死亡率随孢子浓度和时间变化的趋势，以期筛选出对菜青虫具有高致病力的菌株；同时利用筛选出的高致病力菌株侵染菜青虫并测定被侵染的虫体内保护酶活性的变化，以明确菜青虫感染该菌株后其体内的防御机制，为用昆虫病原真菌防治菜青虫提供科学依据。结果如下：
　　1、通过对4株绿僵菌和5株白僵菌菌株基本生物学特性的测定可知，它们在菌落营养生长量、初始产孢时间、产孢量及24h孢子萌发率等方面均存在不同程度的差异。其中Ma60、Mf82、Bbr17与Bbr12的基本生物学性状优于其他5种菌株，15d时的菌落直径分别为73.22mm、70.95mm、71.44mm和70.49mm；初始产孢时间相对较短；产孢量分别为5.30×108/cm2、5.52×108/cm2、5.65×108/cm2和5.18×108/cm2；24h的孢子萌发率均高于95％。
　　2、测定了9种菌株对菜青虫的累积致死率，结果表明：接种绿僵菌Ma60, Mf82与接种白僵菌Bbr17, Bbr12菌株后，对菜青虫的累积校正死亡率分别达到96.67%，83.33%，90%和86.67%，而其他5种菌株在接种14d均未达到80%。在生物学指标测定及致死率测定的基础上，筛选出4个性状良好及致死率高的Ma60、Mf82、Bbr12和Bbr17菌株对菜青虫进行毒力测定。结果表明：4种菌株中Ma60菌株对菜青虫的校正死亡率最高，达96.4%，僵虫率高达84.1%，致死中时LT50最短，仅为2d。Bbr17其次，校正死亡率和僵虫率分别为88.9%和75.6%，LT50为2.85d。在筛选出Ma60和Bbr17菌株的基础上，采用喷雾法测定了两种菌株在浓度为1.0×104、1.0×105、1.0×106、1.0×107、1.0×108个孢子/mL时对菜青虫的致病力。结果表明：Ma60菌株的致死速度也明显快于 Bbr17，因此选择金龟子绿僵菌 Ma60菌株做进一步分析。用时间-剂量-死亡率模型(time-dose-mortality model, TDM)对菜青虫的致病力数据进行模拟，菜青虫接种后第5d的LC50估计值为2.18?104孢子/mL，LC90估计值为2.43?107孢子/mL。金龟子绿僵菌对菜青虫的致死时间和浓度有关，供试菜青虫的 LT50值随着孢子悬浮液浓度的增加而逐渐减小，在1.0×105孢子/mL?1.0×108孢子/mL的范围内，菜青虫的LT50值从4.2d降到2.0d。结果显示了金龟子绿僵菌Ma60菌株在菜青虫的生物防治中具有较强的应用潜力。
　　3、采用分光光度法测定了菜青虫被金龟子绿僵菌感染后体内蛋白质含量及保护酶活性的变化，以明确菜青虫感染金龟子绿僵菌后其体内的防御机制。结果表明，用金龟子绿僵菌处理后菜青虫体内总蛋白含量显著低于对照组，这表明菜青虫体内蛋白质的代谢受到干扰；感病的菜青虫体内总超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)均呈现先上升后下降趋势，反映出菜青虫在金龟子绿僵菌侵染初期防御能力增强，后期降低。其中，SOD、POD和CAT活力分别在接种后第36 h、24 h和48 h达到高峰，说明菜青虫在抵抗金龟子绿僵菌侵染过程中，首先发生作用的保护酶是POD，随后为SOD，而CAT是最后发生作用的保护酶。

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1 文献综述

1.1菜青虫的危害

1.2 菜青虫的防治现状

1.3 昆虫病原真菌资源概况

1.4 白僵菌

1.5 绿僵菌

1.6 白僵菌和绿僵菌的致病机理

1.7 昆虫体内保护酶活性的研究

2引 言

3 材料与方法

3.1 供试昆虫

3.2 供试菌株

3.3 主要仪器

3.4 不同白僵菌与绿僵菌菌株的基本生物学特性测定

3.5 白僵菌和绿僵菌对菜青虫的致病力测定

3.6 菜青虫感染高毒力菌株后体内保护酶活性的测定

4 结果与分析

4.1不同白僵菌与绿僵菌菌株的基本生物学特性测定结果

4.2 白僵菌和绿僵菌对菜青虫的致病力

4.3 金龟子绿僵菌Ma60对菜青虫体内保护酶活性的影响

5 讨论

5.1不同白僵菌与绿僵菌菌株基本生物学特性的差异

5.2不同白僵菌和绿僵菌菌株对菜青虫的致病力大小

5.3菜青虫感染金龟子绿僵菌Ma60后体内保护酶活性的变化

6结论

6.1不同白僵菌与绿僵菌菌株的基本生物学特性

6.2 不同白僵菌和绿僵菌菌株对菜青虫的致病力

6.3金龟子绿僵菌Ma60对菜青虫体内保护酶活性的影响

参考文献

致谢

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