球形幽门螺杆菌vacA、cagA基因克隆及序列分析

摘要

本文克隆了球形H.pylorivacA、cagA基因，并进行序列测定及表达，研究了球形H.pylori的致病性，并为抗H.pylori疫苗的研制奠定实验基础。从球形幽门螺杆菌基因组DNA中特异扩增出vacA、cagA基因片段，扩增的目的片段经纯化回收后克隆到pMD-18T中，转化入大肠杆菌JM109。阳性重组质粒用PCR及双酶切鉴定，并进行序列测定。研究结论：成功地对球形幽门螺杆菌vacA、cagA基因进行体外扩增及构建原核重组质粒pMD-18T-vacA、pMD-18T-cagA、pET32a(+)-vacA、pET32a(+)-cagA，并经酶切及序列分析所验证，证明球形幽门螺杆菌含有完整的vacA、cagA基因，并且能在大肠杆菌中获得高效表达。球形H.pylori含有vacA、cagA基因并能体外克隆和表达，可能与其潜在的致病性有关。

目录

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第一部分球形幽门螺杆菌的研究进展

第二部分球形幽门螺杆菌vacA、cagA基因克隆及序列分析

0引言

1球形幽门螺杆菌的诱导及培养

2球形幽门螺杆菌基因组DNA的提取

3聚合酶链式反应扩增vacA、cagA基因

4TA克隆、测序及表达载体的构建

5 VacA、CagA蛋白的表达

6讨论

7研究结论

8拟进一步研究内容

参考文献

附录一：vacA基因测序彩图

附录二：cagA基因测序彩图

附录三：中英文缩略词表

个人简历

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代表作三

致谢