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基金项目
1 文献综述
1.1 猪基因组研究现状
1.2 猪中重要生理功能相关基因研究现状与继续寻找新基因的必要性
1.2.1 与生长和胴体性状相关的候选基因
1.2.2 与肉质性状相关的候选基因
1.2.3 猪生产性状相关候选基因进一步挖掘的必要性
1.3 葡萄糖转运和氨基己糖路径
1.3.1 葡萄糖转运
1.3.2 氨基己糖通路
1.4 GFAT1基因的研究进展
1.5 SLC2A基因家族的研究进展
1.5.1 GLUTs的分子构型
1.5.2 GLUTs的类型
1.5.3 SLC2A基因家族的定位及蛋白GLUTs的结构,分布
2 本研究的目的和意义
3 材料和方法
3.1 材料
3.1.1 组织样品
3.1.2 DNA样品
3.1.3 主要仪器设备
3.1.4 培养基、工具酶及试剂盒
3.1.5 主要试剂及配制
3.1.6 数据库及分析软件
3.2 方法
3.2.1 猪候选基因的分离方法
3.2.2 六个基因染色体定位
3.2.3 利用RT-PCR进行GFAT1和SLC2A4编码区的扩增
3.2.4 利用RT-PCR进行GFAT1和SLC2A4基因组织表达谱研究的方法
3.2.5 PCR-RFLP方法检测猪GFAT1和SLC2A4基因的多态性
3.2.6 多态标记与性状的关联分析方法
4 结果
4.1 基因片段的分离、序列分析与鉴定结果
4.1.1 总RNA的提取与检测结果
4.1.2 分离猪GFAT1、SLC2A2、SLC2A3,SLC2A4、SLC2A5、SLC2A8和SLC2A12基因的结果
4.1.3 猪GFAT1基因完整编码区(CDS)的序列分析
4.1.4 猪SLC2A4基因完整编码区(CDS)的序列分析
4.2 基因的定位结果
4.2.1 利用SCHP进行染色体区域定位结果
4.2.2 利用辐射杂种板RH进行精细定位结果
4.3 RT-PCR扩增的结果
4.3.2 GFAT1组织表达表达谱分析
4.3.2.SLC2A4组织表达表达谱分析
4.4 猪GFAT1和SLC2A4基因的SNP检测及其与性状的关联分析
4.4.1 猪GFAT1基因第八内含子多态检测及与性状的关联分析
4.4.2 猪SLC2A4基因第四外显子多态检测及与性状的关联分析
5 讨论
5.1 关于基因的物理定位
5.1.1 定位引物的设计
5.1.2 基因的定位结果
5.3 关于GFAT1和SLC2A4基因的组织表达谱
5.4 关于基因的多态性检测及性状的关联分析
5.4.1 GFAT1基因第八内含子的多态性
5.4.2 SLC2A4基因第四外显子的多态性
6 小结
6.1 本研究获得的结果
6.2 本研究的创新点
6.3 本研究的不足之处
6.4 下一步值得研究的工作
参考文献
在读期间发表的论文题录
附录
附录1 缩略词表
附录2 扩增产物的序列
致谢
华中农业大学;