不同分子伴侣活性对新生肽链的影响

目录

第1章 绪 论

1.1分子伴侣与蛋白质折叠

1.2核糖体结合分子伴侣

1.3 Trigger Factor的结构组成及功能

1.4 不同分子伴侣间的相互作用

1.5课题研究内容及研究意义

1.6本文技术路线

第2章 实验材料与方法

2.1实验材料

2.1.1原核表达系统

2.1.2主要试剂及溶液的制备

2.1.3主要实验仪器

2.2实验方法

2.2.1 目的质粒构建

2.2.2 蛋白的诱导表达和纯化

2.2.3蛋白活性测定

第3章 不同特性的分子伴侣的制备和表征

3.1目的蛋白的制备

3.1.1目的蛋白的选择

3.1.2构建不同特性的分子伴侣质粒

3.1.3蛋白的诱导表达与纯化

3.2目的蛋白的光谱表征

3.3目的蛋白的活性检测

3.3.1 NTF-DnaK及DnaK的活性检测

3.3.2 NTF-ClpB及ClpB的活性检测

3.4讨论

3.5本章小结

第4章 TF不同特性的分子伴侣生理功能分析

4.1 TF敲除对基因表达的影响

4.1.1 TF敲除对基因转录水平表达的影响

4.1.2 TF敲除对基因蛋白水平表达的影响

4.1.3Δtig菌株在转录水平和蛋白水平表达的比较

4.2 DnaK敲除对基因表达的影响

4.2.1 DnaK敲除对基因转录水平表达的影响

4.2.2 DnaK敲除对基因蛋白水平表达的影响

4.2.3Δtig菌株和ΔdnaK菌株转录水平表达的比较

4.2.4Δtig菌株和ΔdnaK菌株蛋白水平表达的比较

4.3 ClpB蛋白组学分析

4.3.1 ClpB底物类型分析

4.3.2 TF与ClpB组学数据差异分析

4.4 Skp蛋白组学分析

4.4.1 Skp底物类型分析

4.4.2 TF与Skp组学数据差异分析

4.5单基因敲除菌株的表型变化

4.6讨论

4.7本章小结

结论

展望

参考文献

声明

致谢