miR--93调控Nrf2信号通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用机制研究

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前 言

第一部分 miR-93介导Nrf2信号通路在OGD心肌细胞中的作用

1 材料与方法

1.1 实验试剂及仪器

1.2 大鼠心肌细胞原代培养及鉴定

1.3 心肌细胞OGD/R 模型的建立

1.4 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测miR-93水平

1.5 靶基因预测及荧光素酶验证实验

1.6 细胞转染及RT-qPCR

1.7 Western blot 实验

1.8 Annexin V/PI 双染色法

1.9 统计学方法

2 结果

2.1 心肌细胞形态观察及免疫荧光双染纯度鉴定

2.2 各组OGD/R 心肌细胞的超微结构变化

2.3 各组OGD/R 心肌细胞的存活率及LDH、CK-MB和cTnI 活性

2.4 miR-93在各OGD/R 组中的表达水平比较

2.5 生物信息学软件预测miR-93的靶基因

2.6 双荧光素酶报告检测验证靶向关系

2.7 miR-93 antagomir 对OGD/R 心肌细胞Nrf2 表达的影响

2.8 miR-93 antagomir 对OGD/R 心肌细胞的凋亡影响

3 讨论

4 小结

第二部分 miR-93 在MIRI大鼠模型中的表达及作用

1 材料与方法

1.1 实验试剂及仪器

1.2 实验动物

1.3 实验方法

1.4 心肌损伤标记物的检测

1.5 HE 染色

1.6 心肌梗死面积的测定

1.7 RT-qPCR 及western blot 实验

1.8 氧化应激指标的检测

1.9 心肌凋亡指数的检测

1.10 统计学方法

2 结果

2.1 miR-93和Nrf2 在各组大鼠心肌组织中的表达

2.2 心肌组织的形态学变化

2.3 心肌梗死面积及心肌损伤标记物的变化

2.4 心肌组织氧化应激指标的变化

2.5 心肌组织凋亡检测及相关蛋白的表达

3 讨论

4 小结

全文总结

参考文献

综 述1:miRNA与心血管疾病关系的研究进展

综述2:Nrf2与心肌缺血再灌注损伤的研究进展

致谢

个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果