声明
中英文缩略词对照
引言
1 实验材料
1.1 实验细胞及试剂
1.2 实验仪器及耗材
1.3 溶液的制备
1.3.1 富勒烯聚乙氧基乙醇(F2)溶液
1.3.2 双蒸水溶液
1.3.3 细胞基础培养液(basic medium,BM)
1.3.4 地塞米松储存液（dexamethasone）
1.3.5 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（3-isobutyl-1-methylxanthine,IBMX）储存液
1.3.6 β-甘油磷酸盐储存液（β-glycerophosphate,β-GP）
1.3.7 L-抗坏血酸钠储存液（L-ascorbate）
1.3.8 细胞成脂分化诱导液（adipogenic medium,AM）
1.3.9 细胞成骨分化诱导液（osteogenic medium,OM）
1.3.10 胶原酶溶液（collagenase）
1.3.11 胰蛋白酶溶液(trypsin)
1.3.12 油红O染液（oil red O）
1.3.13 氯化十六烷基吡啶溶液(cetylpyridinium chloride,CPC)
1.3.14 茜素红染液（alizarin red）
1.3.15 结晶紫染液（crystal violet）
1.3.16 巨噬细胞集落刺激因子储存液(macrophage colony-stimulating factor,MCSF)
1.3.17 脂多糖溶液(lipopolysaccharide,LPS)
1.3.18 细胞核因子κB受体活化因子配基（ receptor activator for nuclear factor-Kappa B ligands,Rankl）
2 实验方法
2.1 FPR1基因表达及富勒烯衍生物F2对ADSCs成脂及成骨分化的影响
2.1.1 C57BL/6野生基因型小鼠脂肪干细胞、FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞以及人脂肪干细胞的提取与培养
2.1.2 细胞处理
2.1.3 油红O染色
2.1.4 茜素红染色（ARS）及矿化定量分析
2.1.5 倒置显微镜观察细胞生长、染色情况及记录
2.1.6 荧光染色及观察记录
2.1.7 基因表达分析（RT-PCR）
2.1.8 WST-1增殖试验
2.1.9 结晶紫染色（CFU）
2.2 FPR1基因表达及富勒烯衍生物F2对BMMs分化的影响
2.2.1 C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠骨髓原代巨噬细胞的提取与培养
2.2.2 细胞处理
2.2.3 WST-1增殖试验
2.2.4 基因表达分析（RT-PCR）
2.2.5 亚硝酸盐测定实验
2.2.6 倒置显微镜观察细胞生长、形态变化及记录
2.3 数据分析
3 实验结果
3.1 FPR1基因的缺失可使小鼠脂肪干细胞成脂分化的能力增强
3.2 成脂诱导对相关基因在C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞分化过程中表达的影响
3.3 成骨诱导对相关基因在C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞分化过程中表达的影响
3.4 富勒烯衍生物F2针对C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞以及人类脂肪干细胞的细胞毒性影响
3.5 富勒烯衍生物F2对人类脂肪干细胞作用后的细胞内位置追踪
3.6 富勒烯衍生物F2对C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞成脂分化的影响
3.7 FPR1基因和富勒烯衍生物F2对C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞成骨分化的影响
3.8 富勒烯衍生物F2针对C57BL/6野生基因型小鼠骨髓原代巨噬细胞无细胞毒性影响
3.9 富勒烯衍生物F2对相关炎性基因在C57BL/6野生基因型小鼠骨髓原代巨噬细胞活化过程中表达的影响
3.10 FPR1基因表达对相关炎性基因在小鼠骨髓原代巨噬细胞活化过程中表达的影响
3.11 富勒烯衍生物F2可抑制C57BL/6野生基因型小鼠骨髓原代巨噬细胞亚硝酸盐的产生
3.12 富勒烯衍生物F2对C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠骨髓原代巨噬细胞破骨分化诱导过程中形态的影响
3.13 富勒烯衍生物F2对破骨分化相关基因在C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠骨髓原代巨噬细胞破骨分化诱导过程中表达的影响
3.14 富勒烯衍生物F2对C57BL/6野生基因型小鼠及FPR1基因敲除小鼠骨髓原代巨噬细胞破骨分化诱导过程中亚硝酸盐产生的影响
4 讨论
4.1 FPR1基因表达及富勒烯衍生物对脂肪干细胞成脂及成骨分化的影响
4.2 FPR1基因表达及富勒烯衍生物对骨髓巨噬细胞炎症诱导的影响
4.3 FPR1基因表达及富勒烯衍生物对骨髓巨噬细胞破骨分化的影响
结论
参考文献
综述:甲酰肽受体对细胞分化的影响及在多种疾病发展中的作用
参考文献
个人简历及在校期间发表论文情况
致谢
郑州大学;
