海洋细菌甘油糖脂合成酶鉴定、生化性质与催化应用研究

目录

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第一章 绪论

1.1 甘油糖脂

1.1.1 甘油糖脂的分类

1.1.2 甘油糖脂的生物功能

1.1.3 酶的合成

1.1.4 甘油糖脂的提取方法

1.1.5 甘油糖脂的纯化与分离方法

1.2 磷限制下海洋细菌中的膜质重构

1.3 本课题的立题意义及研究内容

1.3.1 立题依据与意义

1.3.2 研究内容

第二章 糖基转移酶GTcp基因克隆、表达纯化与活性分析

2.1 试验材料与仪器

2.1.1 质粒和感受态细胞

2.1.2 主要试剂

2.1.3 培养基

2.1.4 主要仪器

2.2 试验方法

2.2.1 基因GTcp的克隆和重组质粒的构建

2.2.2 酶的表达与纯化

2.2.3 糖基转移酶GTcp活性检测

2.3 结果与讨论

2.3.1 基因GTcp的克隆

2.3.2 糖基转移酶GTcp的纯化

2.3.3 酶的活性分析

2.4 小结

第三章 糖基转移酶GTcp的酶学性质研究

3.1 试验材料与仪器

3.1.1 主要试剂

3.1.2 主要仪器

3.2 试验方法

3.2.1 温度对酶活的影响

3.2.2 pH对酶活的影响

3.2.3 NaCl浓度对酶活的影响

3.2.4 金属离子对酶活的影响

3.2.5 表面活性剂、还原剂和变性剂对酶活的影响

3.2.6 动力学研究

3.2.7 GTcp在最佳条件下催化DAG生成MGlu-DAG

3.3 结果与讨论

3.3.1 温度对GTcp的影响

3.3.2 pH对GTcp酶活的影响

3.3.3 NaCl浓度对GTcp酶活的影响

3.3.4 金属离子对GTcp转糖基活性的影响

3.3.5 表面活性剂、还原剂和变性剂对GTcp酶活的影响

3.3.6 GTcp的底物特异性

3.3.7 最佳条件下GTcp催化DAG生成MGlu-DAG

3.4 小结

第四章 酶的生物信息学分析与点突变体构建

4.1 材料与方法

4.2 结果与讨论

4.2.1 GTcp的氨基酸序列和结构分析

4.2.2 GTcp的催化机制与底物结合机制研究

4.3 小结

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

参考文献

附录1 攻读硕士学位期间发表论文目录

致谢