声明
符号说明
1 前言
1.1 表观遗传学
1.2 染色质结构
1.3 DNA 甲基化
1.4 组蛋白的共价修饰
1.4.1 甲基化修饰
1.4.2 乙酰化修饰
1.4.3 磷酸化修饰
1.4.4 其它修饰
1.5 LSD1
1.5.1 LSD1 的结构与功能
1.5.2 LSD1 在癌症发生与进展中的作用
1.6 蛋白的 neddylation 修饰
1.6.1 NEDD8 的结构
1.6.2 Neddylation 修饰的相关作用酶
1.6.3 以 neddylation 修饰为靶点的抗肿瘤研究
1.7 EMT
1.8 本论文的主要研究目的和研究内容
2 UBE2M与 LSD1在胃癌组织中表达量的相关性分析
引言
2.1 实验材料
2.1.1 实验仪器
2.1.2 实验试剂
2.1.3 常用溶液配制
2.2 实验方法
2.2.1 免疫组化
2.2.2 统计分析
2.3 实验结果
2.3.1 LSD1 与 UBE2M 在胃癌组织中表达量的相关性分析
2.3.2 LSD1 与 UBE2F 在胃癌组织中表达量的相关性分析
小结
3 LSD1 neddylation 修饰的确定及 LSD1与 UBE2M 相互作用的研究
引言
3.1 实验材料
3.1.1 实验仪器
3.1.2 实验试剂
3.2 实验方法
3.2.1 细胞的复苏、传代与冻存
3.2.2 蛋白质的提取
3.2.3 BCA 蛋白定量
3.2.4 Western-blot 实验
3.2.5 质粒提取实验
3.2.6 细胞转染实验
3.2.7 免疫共沉淀实验
3.2.8 细胞免疫荧光实验
3.2.9 蛋白质谱分析
3.3 实验结果
3.3.1 质谱分析UBE2M 与LSD1的相互作用以及鉴定 LSD1 的neddylation修饰
3.3.2 UBE2M 与 LSD1 存在共定位
3.3.3 UBE2M 与 LSD1 蛋白间存在着结合作用
小结
4 UBE2M 相互作用蛋白对于 LSD1 neddylation 修饰作用影响以及UBE2M对LSD1蛋白表达量的调节
引言
4.1 实验材料
4.1.1 实验仪器
4.1.2 实验试剂
4.2 实验方法
4.2.1 细胞转染实验
4.2.2 免疫共沉淀实验
4.2.3 Western-blot 实验
4.2.4 体外 neddylation 实验
4.3 实验结果
4.3.1 利用 UBE2M 抗体免疫共沉淀得到的蛋白复合物可以促进重组 LSD1的neddylation修饰
4.3.2 胃癌细胞中敲低以及过表达 UBE2M 后 LSD1 表达量的变化
小结
5 UBE2M 对胃癌细胞增殖与迁移性能的调控及 LSD1 在其中作用的研究
引言
5.1 实验材料
5.1.1 实验仪器
5.1.2 实验试剂
5.2 实验方法
5.2.1 MTT 实验
5.2.2 划痕实验
5.2.3 细胞转染实验
5.2.4 Western-blot 实验
5.3 实验结果
5.3.1 敲低 UBE2M 对于六种胃癌细胞增殖的影响
5.3.2 过表达 UBE2M 对于六种胃癌细胞增殖的影响
5.3.3 敲低 UBE2M 对于胃癌细胞 MGC-803 和 MGC-803（LSD1 knockout）迁移的影响
5.3.4 过表达 UBE2M 对于胃癌细胞 MGC-803 和 MGC-803（LSD1 knockout）迁移的影响
小结
结论
参考文献
个人简历与研究成果
个人简历
硕士在读期间论文发表成果
研究生期间的荣誉与奖励
致谢
郑州大学;
