靶向肽脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)的抑制剂筛选及体外抗肿瘤活性评价

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缩略词表

第一章 前言

1.1 Pin1结构与生物学功能

1.2 前列腺癌与食管癌研究现状

1.3 Pin1与前列腺癌、食管癌的关系

1.4 Pin1抑制剂的研究进展

1.5 本课题研究内容

第二章 实验材料与实验方法

2.1 实验材料

2.1.1 细胞系

2.1.2 实验仪器

2.1.3 实验耗材

2.1.4 实验试剂

2.1.5 试剂配制

2.2 实验方法

2.2.1 细胞培养

2.2.2 MTT实验

2.2.3 集落形成实验

2.2.4 Transwell实验

2.2.5 细胞周期实验

2.2.6 热迁移实验（CETSA）

2.2.7 免疫共沉淀实验（Co-IP）

2.2.8 蛋白免疫印迹法（Western Blot）

2.2.9 细胞转染及稳转细胞株的筛选

2.2.10 急毒试验

2.2.11 统计学分析

第三章 实验结果

3.1 Pin1在不同肿瘤细胞中的表达

3.2 基于Pin1晶体结构的计算机辅助虚拟筛选

3.3 细胞水平筛选得到显著抑制Pin1活性的化合物1169

3.4 化合物1169在PC3和KYSE70细胞中靶向抑制Pin1

3.4.1 化合物1169对PC3和KYSE70细胞的热迁移分析

3.4.2 化合物1169在PC3和KYSE70细胞中显著抑制Pin1与CyclinD1的结合

3.4.3 化合物1169对稳定沉默Pin1的PC3、KYSE70细胞中Pin1下游蛋白表达的影响

3.5 化合物1169显著抑制PC3和KYSE70细胞的增殖、集落形成及迁移

3.5.1 化合物1169 显著抑制PC3 和KYSE70 细胞的增殖

3.5.2 化合物1169显著抑制PC3和KYSE70细胞集落形成

3.5.3 化合物1169显著抑制PC3和KYSE70细胞迁移

3.6 化合物1169引起PC3、KYSE70细胞周期阻滞

3.7 化合物1169对Pin1下游蛋白表达的影响

3.8 化合物1169体内应用具有较好的安全性

第四章 讨论

第五章 全文总结

参考文献

个人简历

致谢