口腔矫治器治疗OSAHS对雄性新西兰兔生殖系统的影响

摘要

目的:通过建立雄性新西兰兔阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)的动物模型,了解OSAHS对生殖系统的影响;采用下颌前移矫治器(Mandibularadvancement device,MAD)治疗OSAHS,研究MAD治疗OSAHS对雄兔睾丸光电镜结构及附睾尾中精子的影响。为临床研究MAD治疗OSAHS对男性生殖能力的影响提供实验室数据,为预防儿童OSAHS可能导致的不育提供理论依据。　　 方法:30只雄性新西兰兔随机分为3组:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征组(OSAHS组)、下颌前移矫治器治疗组(MAD组)和正常对照组,每组10只。OSAHS组和MAD组实验动物均以1％戊巴比妥钠行全身麻醉,于软腭中间距软硬腭交界0.5cm处,粘膜下肌层注射聚丙烯酰胺水凝胶2ml,动物出现明显打鼾和间断的呼吸暂停,注射后仰卧位头颅侧位片显示软腭后缘上1/4点、1/2点、3/4点处上气道宽度较对照组明显狭窄,动脉血气分析发现注射后动物睡眠发生呼吸暂停时血氧饱和度较对照组降低了22％。以上说明OSAHS动物模型建立成功。MAD组配戴下颌前移矫治器引导下颌向前。　　 三组动物每天以5～6ml/kg经口灌注10％水合氯醛后,仰卧位睡眠4-6小时/天,持续8周。仰卧位睡眠8周后,三组动物在1％戊巴比妥钠全麻下取材,①暴露右侧睾丸于睾丸纵轴、横轴相交处切取1mm3大小的睾丸组织立即放入预冷的4％戊二醛中(此操作在30秒内完成),常规透射电镜标本处理,Epon812包埋,Hitach-7500透射电镜下观察。②取左侧睾丸放入4％多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋,HE染色,AX-80万能显微镜下观察睾丸组织学改变。同时,取腭咽部凝胶注射部位组织,固定于4％多聚甲醛中,观察其组织学结构。③同一麻醉状态下,取兔附睾尾组织,置于5ml37℃生理盐水中尽可能剪碎,混匀后用200目滤网过滤,对滤液进行适当稀释后进行精子计数、精子活力、精子活率及精子畸形率的检测。　　 对上气道间隙、血气分析及附睾尾中精子计数、精子活力、精子活率及精子畸形率的数据结果应用SPSS13.0统计软件进行统计学分析,所有数据以Mean±SD表示,单因素比较采用方差分析,多组间均数两两比较用最小显著性(least significant difference,LSD)检验,相关分析采用直线回归,检验水准为α=0.05。　　 结果:仰卧位上气道间隙宽度分析:OSAHS组软腭1/4点、1/2点和3/4点后上气道间隙明显小于MAD组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。MAD组较对照组变窄,但无显著性差异(P＞0.05)。血气分析:OSAHS组较MAD组和对照组的血氧饱和度、氧分压和pH值均显著降低,差别有统计学意义(P＜0.05)。二氧化碳分压明显高于MAD组和对照组,差别有统计学意义(P＜0.05)。而MAD组和对照组以上各项指标相比均无统计学意义(P＞0.05)。　　 注射部位组织学观察可发现:肉眼观察凝胶注射部位,白色透明状,质地均匀。其外有一层薄而透明的包膜,白色凝胶状物质地较韧且富有弹性,局限于软腭软组织中,边界清楚,未见向周围组织扩散。常规HE切片光镜下观察见凝胶被染成蓝色,呈交联状,与周围组织界限清楚,凝胶表面有一层排列整齐的胶原纤维和弹性纤维形成的薄层包膜,没有引起周围组织营养不良及坏死,对周围组织未见明显损伤。　　 肉眼观察三组动物睾丸外形及大小无明显改变。光镜下可以观察到OSAHS组动物睾丸生精细胞的排列较紊乱,生精小管内管腔内容物空虚。生精上皮的层次紊乱,生精小管中可见有细胞呈圆形,胞浆红染,核染色质聚集成团块状。MAD组生精细胞的排列基本正常,部分生精上皮层次紊乱,生精小管中偶见胞浆红染的圆形细胞。正常对照组生精细胞排列整齐,内容物充实,层次分明,细胞未见水肿。　　 透射电镜观察发现,OSAHS组生精细胞中部分线粒体空泡化,稍有肿胀,滑面内质网及粗面内质网扩张,部分粗面内质网脱颗粒,细胞核膜缺损。MAD组细胞未见明显肿胀及空化,内质网轻度扩张、脱颗粒。细胞核膜变化不明显。对照组细胞未见以上变化。　　 附睾尾精子观察发现OSAHS组动物精子计数、精子活力、精子活率较MAD组、对照组明显降低,精子畸形率明显升高,有统计学意义(P＜0.05);MAD组动物精子计数、精子活力、精子活率较正常对照组降低,精子畸形率升高,但无统计学意义(P＞0.05);将血气分析中血氧饱和度与附睾尾中精子畸形率进行相关分析发现二者呈负相关。　　 结论:　　 下颌前移矫治器治疗OSAHS,能有效减缓缺氧对睾丸中生精细胞的损伤,有效提高精子质量。

目录

文摘

英文文摘

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 OSAHS与男性生殖健康的研究进展

致谢

个人简历