第一章 文献综述
1 研究背景
1.1兴义鸭概述
1.2 MEF2基因家族
1.3骨骼肌发育机制概况
1.4 MEF2C基因的结构与定位
1.5 MEF2C基因互作调控因子
1.6 MEF2C基因研究进展
1.7启动子
1.8可变剪切
2 本研究的目的与意义
第二章 兴义鸭MEF2C基因启动子区多态性研究
1 试验材料
1.1 试验动物与样品
1.2 主要试验试剂
1.3 主要仪器设备
1.4 主要试剂的配制
2 试验方法
2.1引物的设计与合成
2.2基因组DNA提取
2.3 PCR扩增及测序
2.4生物信息学分析
2.5数据分析
3 结果与分析
3.1 MEF2C基因启动子区PCR 扩增结果
3.2测序结果分析
3.3 MEF2C基因启动子序列生物信息学分析
3.4 MEF2C基因启动子SNPs与屠宰性状的关联性分析
4 讨论
5 小结
第三章 MEF2C基因可变剪切体的mRNA表达差异研究
1 试验材料
1.1实验动物与样品
1.2主要试剂
1.3主要仪器设备
1.4常用试剂配制
2 试验方法
2.1引物的设计与合成
2.2组织总RNA提取
2.3 cDNA合成
2.4 MEF2C基因生物信息学分析
2.5实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
2.6数据分析处理
3 结果与分析
3.1 MEF2C基因CDS区PCR扩增检测结果
3.2兴义鸭MEF2C基因不同剪切体的克隆
3.3兴义鸭MEF2C基因生物信息学分析
3.4 MEF2C基因可变剪切体的实时荧光定量PCR
4 讨论
5 小结
第四章 兴义鸭MEF2C基因可变剪切体真核表达载体的构建及表达
1 试验材料
1.1菌株、载体
1.2试验主要试剂
1.3主要试剂盒
1.4主要试验仪器
1.5所用试剂的配制
2 试验方法
2.1实时荧光定量PCR
2.2成肌细胞培养
2.3 pEGFP-C1-MEF2C-a、pEGFP-C1-MEF2C-b载体的构建
2.4 pEGFP-C1-MEF2C-a、pEGFP-C1-MEF2C-b重组质粒瞬时转染成肌细胞
2.5成肌细胞RNA提取及反转录
2.6实时荧光定量PCR检测
2.7数据处理
3 结果与分析
3.1兴义鸭成肌细胞的形态观察及生物学特性
3.2兴义鸭成肌细胞的PCR鉴定
3.3 pEGFP-C1-MEF2C-a、pEGFP-C1-MEF2C-b载体构建及双酶切鉴定
3.4兴义鸭pEGFP-C1-MEF2C-a、pEGFP-C1-MEF2C-b真核表达载体转染效率检测
3.5过表达MEF2C-a、MEF2C-b对肌肉分化调控相关基因的影响
4 讨论
5 小结
第五章 结论与展望
1 结论
2 展望
参考文献
致谢
附录
1 攻读硕士期间参加的科研课题
2 攻读硕士期间参与发表文章
声明
贵州大学;
