1前言
1.1赤霉素的研究进展
1.2 赤霉素的信号通路
1.3 GID1的研究进展
1.4 TILLING技术
1.4.1 TILLING技术研究近况
1.4.2 TILLING技术的基本原理
1.4.3 TILLING技术的操作流程
1.5本论文的研究目的和意义
1.6 技术路线
2材料与方法
2.1试验材料及仪器
2.1.1供试材料
2.1.2试验仪器
2.1.3试验试剂
2.2 试验方法
2.2.1 高粱植株生物学性状的测定及突变体库的构建
2.2.2生理指标测定项目及方法
2.3 酿酒高粱赤霉素受体基因GID1的TILLING分析
2.3.1 DNA提取
2.3.2目的片段引物设计
2.3.3 PCR扩增及引物筛选技术
2.3.4 CEL-I酶切
2.3.5 CEL-Ⅰ酶的提取及 PCR 产物的酶切
2.3.6 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.4 M2代植株的表型验证
2.5 突变群体 M1、M2代表型突变频率计算方法
2.6数据分析
2.7生物学分析网站
3 结果与分析
3.1 酿酒高粱 EMS 突变体库的构建
3.1.1 M1植株突变表型的鉴定
3.1.2 M2植株突变表型的鉴定
3.2 M2代酿酒高粱抗旱生理指标与农艺性状指标
3.2.1 M2代酿酒高粱农艺性状指标分析
3.2.2 M2代酿酒高粱抗旱生理指标
3.3 酿酒高粱突变植株GID1基因克隆及生物信息学分析
3.3.1氨基酸家族分析
3.3.2 GID1氨基酸多重序列比对分析
3.3.3氨基酸序列组成分析
3.3.4遗传结构树分析
3.3.5 GID1基因编码蛋白二级结构预测
3.3.6 结构域的三级结构预测
3.4 酿酒高粱GID1基因的TILLING分析
3.4.1 GID1基因点突变检测
3.4.2 GID1基因点突变检测分析
4讨论与结论
4.1 酿酒高粱农艺性状与抗旱生理指标
4.1.1农艺性状与抗旱性
4.1.2 酿酒高粱抗旱生理指标
4.2 EMS 诱变及 TILLING群体构建
4.2.1 EMS诱变方法及适宜浓度
4.2.2 植株突变表型
4.2.3 TILLING技术突变体的筛选及影响检测效率的因素
4.3突变体TILLING分析及生物信息学分析
5 展望
致谢
参考文献
附录
声明
贵州大学;
