流体剪切力对牙周膜成纤维细胞分泌COX-2的影响

摘要

目的:　　探索对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast，HPDLF)施加不同转速及时间的流体剪切力（fluid shear stress，FSS)，对其合成环氧合酶2（cyclooxygenase2，COX-2)的影响，初步探讨两因素与HPDLF分泌COX-2关系。　　材料与方法:　　用高血清结合改良组织块酶消化法培养获得HPDLF，对细胞进行纯化及鉴定后，选用5-8代HPDLF进行体外加力实验。建立体外FSS加载装置系统，分别对细胞加载0rpm、5rpm、8rpm、12rpm、15rpm转速的FSS1、2、6h，使用免疫细胞化学染色检测细胞合成COX-2蛋白量的变化。　　结果:　　实验结果分析表明加力转速、加力时间以及转速与时间的交互作用对细胞合成COX-2均有影响（P值均<0.001），当不加载力时（0rpm），灰度值=250,测定蛋白为阴性表达。当不考虑加力转速因素时，不同时间点灰度值存在差异（P<0.001），加载1h时灰度值开始呈现减小趋势，加载2h时灰度值最低，而6h的灰度值最高（P<0.001）。当不考虑时间因素时，不同转速灰度值存在差异（P<0.001），加载5rpm时灰度值开始降低，当转速增加至12rmp时灰度值最低，再上升到15rpm时灰度值再次升高。从两因素分别来看，提示当加力转速及时间在一定范围内时，测定蛋白阳性表达量与之呈正相关，细胞形态趋于正常；当超出一定范围时，蛋白阳性表达量与之呈负相关，细胞呈现非生理正常形态。当同时考虑双因素变化时（P值均<0.001），转速为12rmp、时间为2h的灰度值最低。提示对HPDLF加载的FSS，其加载转速及时间在一定范围内时，测定蛋白的表达量与之呈正相关，当超出细胞生理承受范围时，蛋白表达量与之呈负相关。在本实验中，当加载12rpm的FSS，2h时，COX-2蛋白的表达量达到峰值。　　结论:　　体外加载FSS可影响HPDLF分泌COX-2蛋白量的表达。当加载转速和时间介于细胞生理状态下可承受范围之内时，对COX-2的合成为促进作用，反之则会抑制COX-2的合成分泌。

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0引 言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 实验方法

2 实验结果

2.1 HPDLF的原代培养

2.2 细胞形态学观察

2.3 细胞鉴定

2.4 HPDLF生长曲线

2.5 HPDLF体外不同加载条件对COX-2表达的影响

3 讨论：

3.1 HPDLF原代培养的方式比较及成功率的影响因数：

3.2牙周膜及HPDLF在牙移动牙槽骨改建机制中的作用：

3.3 选择FSS作为刺激体外培养的HPDLF的依据：

3.4 体外加载不同转速、时间FSS对HPDLF分泌COX-2的影响

4 结论

参考文献

综述：PGE2、COX-2在正畸生物力学中的作用及力对牙移动影响的探讨

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