钾离子通道Kv1.3在钛离子影响T细胞内钙离子浓度的作用研究

摘要

目的:通过观察钛离子与T细胞作用后细胞膜电位、胞内钙离子变化及Kv1.3通道表达情况之间的关系，探讨Kv1.3通道在钛离子影响T细胞内钙离子浓度中的作用。　　方法:1、体外培养Jurkat T细胞，MTT法检测不同浓度Kv1.3通道阻滞剂ShK-Dap22对T细胞增殖活性的影响。　　2、根据是否用植物血凝素PHA活化将Jurkat T细胞分为PHA(+)及PHA（-）两个大组，两组细胞按加入钛离子浓度的不同分别设立对照组、低、中及高浓度组，相对应以Oμ mol/L，25μ mol/L，50μ mol/L，100μ mol/L的钛离子进行干预，实时荧光定量多聚酶链反应(Real-time PCR)检测Kv1.3通道的mRNA的表达情况，流式细胞术检测细胞膜电位及钙离子浓度的变化。同时观察加入ShK-Dap22阻断剂后T细胞膜电位、钙离子浓度及Kv　　1.3通道的mRNA的表达情况的变化。　　结果:1、ShK-Dap22对T细胞增殖具有抑制效应，在0-10 nmol/L时抑制率随浓度的升高而增大，当大于等于10nmol/L时，抑制率无明显差异(P＜0.05)。　　2、PHA(+)组，低、中、高三个浓度组的钛离子可以使T细胞Kv1.3通道mRNA的相对表达量上调、膜电位去极化及胞内Ca2+浓度上升(P＜0.05)，加入ShK-Dap22后，这种上调量与ShK-Dap22(-)组相比有明显降低趋势，但与对照组比较有差异(P＜0.05)。PHA(-)组，低、中、高三个浓度组的钛离子可以使T细胞Kv1.3通道mRNA的相对表达量上调、膜电位去极化及胞内Ca2+浓度上升(P＜0.05)，加入ShK-Dap22后，中、高浓度组的mRNA的相对表达量、膜电位去极化及胞内Ca2+浓度高于对照组(P＜0.05)，而低浓度组mRNA的相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。且低、中浓度组之间的T细胞膜电位去极化及胞内Ca2+浓度比较也无统计学差异(P＞0.05)。　　结论:1、Kv1.3阻滞剂ShK-Dap22能抑制体外培养的T细胞生长，当ShK-Dap22超过10nmol/L时抑制率趋于稳定。　　2、钛离子可通过T细胞膜上钾离子通道Kv1.3升高胞内钙离子浓度。

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摘要

前言

实验一 Kv 1．3钾离子通道阻滞剂ShK-Dap22对T细胞增殖的影响

1．材料和方法

2．结果

3．讨论

4．结论

实验二 钛离子对T细胞Kv 1．3通道mRNA表达的影响

1．材料和方法

2．结果

3．讨论

4．结论

实验三 Kv1．3通道在钛离子影响T细胞膜电位及钙离子浓度的作用

1．材料和方法

1．2实验方法

2．结果

4．结论

全文小结

参考文献

综述 T细胞钾离子通道及其阻滞剂发展综述

致谢

攻读学位期间发表的论文