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第一章 卵母细胞玻璃化冷冻的研究概况
1.1 卵母细胞冷冻保存的意义及概况
1.2 影响玻璃化冷冻卵母细胞的因素
1.2.1 玻璃化冷冻的原理
1.2.2 冷冻保护剂的类型
1.2.3 不同载体对冷冻效果的影响
1.2.4 不同发育阶段的卵母细胞对冷冻效果的影响
1.3 玻璃化冷冻对卵母细胞的影响
1.4 抗冷冻蛋白（AFP）的研究概况
1.4.1 AFP Ⅰ
1.4.2 AFP Ⅱ
1.4.3 AFPⅢ
1.4.4 AFPⅣ
1.4.5 AFGP
1.5 活性氧（ROS）
1.5.1 活性氧的内源性来源
1.5.2 诱导ROS生成的外源因子
1.5.3 ROS对胚胎的有害作用
1.6 细胞DNA损伤及检测方法
第二章 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞发育的影响
2.1 材料
2.1.1 卵母细胞的获取
2.1.2 药品与试剂
2.1.3 主要试剂配置
2.1.4 主要实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 半麦管的制作
2.2.2 卵母细胞的冷冻-复苏
2.2.3 卵母细胞的成熟
2.2.4 孤雌激活
2.2.5 Hoechst染色
2.3 实验设计
2.3.1 实验一：添加不同浓度AFPⅢ对GV期猪卵母细胞发育的影响
2.3.2 实验二：添加不同浓度AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞发育的影响
2.4 数据分析
2.5 结果
2.5.1 添加不同浓度AFPⅢ对 GV期猪卵母细胞发育的影响
2.5.2 添加不同浓度AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞发育的影响
2.6 讨论
2.7小结
第三章 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻MⅡ期猪卵母细胞发育的影响
3.1 材料
3.1.1 卵母细胞的获取
3.1.2 药品与试剂
3.1.3 主要试剂配置及仪器
3.2 方法
3.2.2 卵母细胞的冷冻及解冻
3.2.3 卵母细胞的成熟
3.2.4 孤雌激活
3.3 实验设计
3.3.1 实验一：添加不同浓度AFPⅢ对MⅡ期猪卵母细胞发育的影响
3.3.2 实验二：添加不同浓度AFPⅢ对玻璃化冷冻MⅡ期猪卵母细胞发育的影响
3.4 数据分析
3.5 结果
3.5.1 添加不同浓度AFPⅢ对MⅡ期猪卵母细胞发育的影响
3.5.2 添加不同浓度AFPⅢ对玻璃化冷冻MⅡ期猪卵母细胞发育的影响
3.6 讨论
3.7 小结
第四章 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻猪卵母细胞ROS含量的检测
4.1 材料
4.1.1 卵母细胞的获取
4.1.2 药品与试剂
4.1.3 主要试剂配置及实验仪器
4.2 方法
4.2.4 ROS检测
4.3 实验设计
4.3.1 实验一：添加AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞ROS含量的检测
4.3.2 实验二：添加AFPⅢ对MII期猪卵母细胞ROS含量的检测
4.4 数据分析
4.5 结果
4.5.1 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞ROS含量的检测
4.5.2 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻MII期猪卵母细胞ROS含量的检测
4.6 讨论
4.7 小结
第五章 AFPⅢ对玻璃化冷冻猪卵母细胞DNA损伤的检测
5.1 材料
5.1.1 卵母细胞的获取
5.1.2 药品与试剂
5.1.3 主要试剂配置
5.2方法
5.2.1 卵母细胞的成熟
5.2.2 半麦管的制作
5.2.3 卵母细胞的冷冻及解冻
5.2.4 DNA损伤的检测
5.3 实验设计
5.3.1 实验一：添加AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞DNA损伤的影响
5.3.2 实验二：添加AFPⅢ对玻璃化冷冻MⅡ期猪卵母细胞DNA损伤的影响
5.4 数据分析
5.5 结果
5.5.1 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻GV期猪卵母细胞DNA损伤的影响
5.5.2 添加AFPⅢ对玻璃化冷冻MⅡ期猪卵母细胞DNA损伤的影响
5.6 讨论
5.7 小结
第六章 全文总结
参考文献
致谢
作者简介
攻读学位期间发表论文情况
广西大学;
