肺结核丸的质量控制方法研究

摘要

目的:肺结核丸的质量标准收载于卫生部药品标准中药成方制剂第九册(1994)。现行质量标准不够完善，仅有显微鉴别，重量差异和溶散时限，已不能满足中药现代化质量控制的要求，无法对药品的质量进行全面的有效控制。为此，本文在现行质量标准的基础上，对其进行定性鉴别、含量测定和指纹图谱测定方法的研究，为科学地评价肺结核丸的质量提供试验依据。　　方法:(1)采用薄层色谱法对肺结核丸中的制何首乌、白及、土鳖虫进行定性鉴别。制何首乌:采用硅胶G薄层板，以乙酸乙酯-甲醇-水(20∶2∶1)的溶液为展开剂，紫外灯光(365nm)下检视。白及:采用硅胶G薄层板，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇(6∶2.5∶1)的溶液为展开剂，10％硫酸乙醇溶液为显色剂，置紫外光灯(365nm)下检视。土鳖虫:采用硅胶G薄层板，以甲苯-二氯甲烷-丙酮(5∶5∶0.5)的溶液为展开剂，置紫外光灯(365nm)下检视。　　(2)以二苯乙烯苷为指标，建立制何首乌的含量测定方法。采用Sunfire C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，乙腈-水(25∶75)为流动相，检测波长为320nm，流速为1.0 ml/min，柱温40℃，能较好地测定二苯乙烯苷的含量。　　(3)采用中药HPLC指纹图谱技术，建立了肺结核丸指纹图谱，对共有峰进行确定;利用对照品对峰的成分进行指认;通过与单味药材图谱比对，确定相关色谱峰的归属。　　色谱条件:采用Diamonsil C18柱（4.6mm×250mm，5μm），以乙腈-0.01％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.8ml/min，柱温25℃，检测波长为270nm。　　结果:(1)在定性鉴别中，供试品色谱在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品色谱在与对照药材、对照品色谱相应的位置上不显任何颜色的斑点。　　(2)含量测定中，二苯乙烯苷在289.5～4342ng范围内与峰面积呈良好的线性关系，回归方程Y=3000.2064X+264097.5013(r为0.9995);平均回收率为98.61％(n=6);RSD值为0.79％。在分析浓度下，24小时内基本稳定(RSD=0.88％)。　　(3)建立了肺结核丸HPLC指纹图谱测定方法，通过10批样品确定了10个共有峰，鉴别了其中4个共有峰，初步确定了8个共有峰的归属，10批样品相似度在0.908～0.989之间。　　结论:(1)薄层色谱法鉴别处方中三味药材，其鉴别方法快速简便，各斑点清晰、圆整，分离度良好，无阴性干扰，可作为肺结核丸的定性鉴别方法。　　(2)高效液相色谱法测定肺结核丸中二苯乙烯苷的含量，其方法简便快速，准确可靠，可用于肺结核丸的质量控制。　　(3)所建立的肺结核丸HPLC指纹图谱测定方法，经方法学考察证实，具有良好的精密度、重现性和稳定性，各共有峰间分离度良好，为有效地控制肺结核丸的质量提供试验依据。

目录

声明

摘要

引言

第一部分 肺结核丸的定性鉴别研究

1．1 仪器与设备

1．2 实验试剂

1．3 对照药材、对照品和样品批号及来源

1．4 制何首乌的薄层色谱鉴别

1．4．1 供试品溶液的制备

1．4．2 对照品溶液的制备

1．4．3 阴性对照溶液的制备

1．4．4 鉴别

1．4．5 结果与分析

1．5 土鳖虫的薄层色谱鉴别

1．5．1 供试品溶液的制各

1．5．2 对照药材溶液的制备

1．5．3 阴性对照溶液的制备

1．5．4 鉴别

1．5．5 结果与分析

1．6 白及的薄层色谱鉴别

1．6．1 供试品溶液的制备

1．6．2 对照药材溶液的制备

1．6．3 阴性对照溶液的制备

1．6．4 鉴别

1．6．5 结果与分析

1．7 小结

第二部分 肺结核丸的含量测定研究

2．1 仪器与设备

2．2 实验试剂

2．3 对照品和样品批号及来源

2．4 色谱条件的选择

2．4．1 检测波长的选择

2．4．2 流动相的选择

2．4．3 柱温的选择

2．4．4 色谱柱的选择

2．5 供试品溶液的制备

2．5．1 提取溶剂的选择

2．5．2 提取方法的选择

2．5．3 提取时间的选择

2．6 对照品溶液的制备

2．7 阴性对照溶液的制备

2．8 方法学验证

2．8．1 线性关系考察

2．8．2 精密度试验

2．8．3 稳定性试验

2．8．4 重复性试验

2．8．5 专属性试验

2．8．6 加样回收率试验

2．9 样品含量的测定

2．10 讨论

第三部分 肺结核丸指纹图谱研究

3．1 仪器与设备

3．2 实验试剂

3．3 对照品和样品批号及来源

3．4 色谱条件的选择

3．4．1 流动相的选择

3．4．2 检测波长的选择

3．4．3 柱温的选择

3．4．4 流速的选择

3．4．5 色谱柱的选择

3．5 供试品溶液的制备

3．5．1 提取溶剂的选择

3．5．2 提取方式的考察

3．5．3 提取时间的考察

3．6 对照品溶液的制备

3．7 单味药材溶液的制备

3．8 方法学的考察

3．8．1 精密度试验

3．8．2 重复性试验

3．8．3 稳定性试验

3．9 指纹图谱的建立与分析

3．9．1 共有峰的确定

3．9．2 共有峰的指认与归属

3．9．3 相似度计算

3．10 分析与讨论

结语

文献研究

参考文献

致谢

个人简介及攻读学位期间获得的科研成果

查新报告