芒果三芪肺纤方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用及其机制研究

摘要

目的:本研究主要是通过观察芒果三芪肺纤方(芒果苷、黄芪多糖、三七总皂苷)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的治疗作用并探讨其作用机制,寻求防止肺纤维有效的药物。　　方法:(1)芒果三芪肺纤方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用研究:通过鼻腔一次性滴入6mg/kg博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型。18-22g昆明种雄性小鼠随机分为A空白组、B模型组、C阳性组、D芒果三芪肺纤方组。各给药组于造模后第14d开始给予相应的干预,干预14天后处死各组小鼠。采用试剂盒测定肺组织匀浆中的羟脯氨酸(HYP)含量以及丙二醛(MDA)含量和超氧化物岐化酶(SOD)活力;HE染色观察肺组织病理切片和 Masson染色观察胶原纤维分布;采用 ELISA测白介素-1β(IL-1β)含量。　　(2)芒果三芪肺纤方及其拆方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用研究:造模同上。18-22g昆明种雄性小鼠随机分为a空白组、b模型组、c阳性组、d芒果三芪肺纤方组、e益气化痰方,f益气活血方、g活血化痰方。各给药组于造模后第14d开始给予相应的干预,干预14天后处死各组小鼠。测定指标同上。　　(3)芒果三芪肺纤方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用机制研究:造模、给药、动物分组同第一部分。采用HE染色观察肺组织病理切片和Masson染色观察胶原纤维分布;采用试剂盒测定肺组织匀浆中的羟脯氨酸(HYP)含量;免疫组化法测定TNF-ɑ的表达和实时荧光定量PCR法检测TNF-αmRNA基因表达。　　结果:(1)芒果三芪肺纤方组小鼠毛色、体重等一般情况优于模型组,阳性组、芒果三芪肺纤方组小鼠体重较模型组显著增加(P<0.01-0.05);HE和Masson染色观察显示芒果三芪肺纤方组可以减轻肺泡炎损伤和抑制肺纤维化病变程度(P<0.01);而且能显著性的降低HYP的表达水平(P<0.01)。芒果三芪肺纤方组都能够调节肺纤维化小鼠体内的自由基代谢,显著提高模型小鼠体内总SOD活力(P<0.01),并显著性的降低MDA含量的表达(P<0.01),ELISA法检测IL-β的含量表达显著性的降低(P<0.01)。　　(2)芒果三芪肺纤方组、益气化痰方组、益气活血方组、活血化痰方组小鼠体重较模型组均显著性增加(P<0.01-0.05),芒果三芪肺纤方组和益气化痰方组效果最好;HE和Masson染色观察显示各给药组可以减轻肺泡炎损伤和抑制肺纤维化病变程度(P<0.01),;而且能显著性的降低HYP的表达(P<0.01)。各给药组都能够调节肺纤维化小鼠体内的自由基代谢,显著性地提高小鼠体内总SOD活力(P<0.01),并显著性的降低MDA含量的表达(P<0.01),ELISA法检测表明各给药组IL-β的含量表达显著性的降低(P<0.01)。　　(3)HE和Masson染色观察显示芒果三芪肺纤方组可以明显的减轻肺泡炎损伤和肺纤维化程度(P<0.01);免疫组化的结果显示芒果三芪肺纤方组显著降低TNF-ɑ的表达(P<0.01);RT-PCR的结果显示芒果三芪肺纤方组显著降低TNF-ɑ mRNA的表达(P<0.01)。　　结论:芒果三芪肺纤方组都可以通过以下三个方面发挥作用:(1)提高总SOD活力,降低MDA水平而发挥抗自由基损伤作用;(2)通过降低HYP的含量影响胶原的产生而减少纤维蛋白的形成;(3)通过调节IL-β的表达和TNF-ɑ含量表达对炎症因子释放的抑制而发挥抗炎作用。

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引言

1.芒果三芪肺纤方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用研究

1.1实验材料

1.2方法

1.3结果

1.4小结

2.芒果三芪肺纤方及其拆方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用研究

2.1实验材料

2.2方法

2.3结果

2.4小结

3.芒果三芪肺纤方对博莱霉素致小鼠肺纤维化治疗作用机制研究

3.1实验材料

3.2方法

3.3结果

不足与展望

参考文献

附录

缩略词表

综述

致谢

个人简历及攻读学位期间获得的科研成果