抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠海马神经细胞及Bcl-2蛋白表达的影响

摘要

目的：利用戊四氮(pentylenetetrazole，PTZ)制造急性癫痫(epilepsy，EP)发作的动物模型，观察抗痫煎剂对急性癫痫发作大鼠海马区神经元Bcl-2蛋白的表达的影响及对癫痫发作的控制情况，评价抗痫煎剂对急性癫痫发作大鼠模型的控制情况，神经保护作用及可能的机制。　　方法：Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，随机选出10只作为正常组，其余50只，用戊四氮（PTZ）55mg/kg腹腔注射造成大鼠急性癫痫发作模型，模型成功与否以其发作时的行为变化为主要依据，按Racine分级：0级：无任何反应；1级：面部阵挛，包括眨眼、动须、节奏性咀嚼等；2级：1级加节律性点头；3级：2级加前肢阵挛；4级：3级加后肢站立；5级：4级加摔倒。达到4～5级的大鼠选用，未达到4级的大鼠淘汰。其中造模成功的40只SD大鼠，随机分为4组，每组各10只。一共五组，A组：正常对照组；B组：模型组；C组：抗痫煎剂低剂量预处理组；D组：抗痫煎剂高剂量预处理组；E组：丙戊酸钠预处理组。正常组与模型组：灌服生理盐水，每日2ml/kg；中药低剂量组和高剂量组，灌服抗痫煎剂，分别为5g/kg.d，10g/kg.d；西药组：灌服丙戊酸钠90mg/kg.d。连续灌胃七天。第八天再给B，C，D，E组予戊四氮（PTZ）55mg/kg腹腔注射，A组腹腔注射等量生理盐水，然后观察大鼠行为学的改变。　　结果：潜伏期方面，D、E组与B组比较，其潜伏期明显延长，差异具有显著性意义(P<0.05)。发作级别方面，B组大鼠均为强直阵挛发作(V级)，其余各组发作介于0~V级之间，C、D、E组与B组比较，差异有显著性意义(P<0.05)。　　免疫组化结果显示，神经细胞Bcl-2蛋白表达方面，A、B组Bcl-2抗凋亡蛋白表达较少；经药物预处理后，C、D、E组大鼠海马神经细胞Bcl-2蛋白表达较B组明显增多(P<0.05)；其中C组与D，E组差异有显著意义（P<0.05）；D、E组相比无显著性差异(P>0.05)。　　结论：1.PTZ能成功诱导出大鼠全身强直阵挛模型，在本实验中其适宜剂量为55mg/kg,所造急性癫痫大鼠能观察到痫性大发作。2.抗痫煎剂对PTZ诱导急性癫痫大鼠的痫性发作具有较强的抑制作用。3.抗痫煎剂对PTZ致痫大鼠所致的神经细胞凋亡有抑制作用，其抑制凋亡的分子机制可能是通过促进Bcl-2蛋白表达而实现的。说明抗痫煎剂对痫性发作后神经元凋亡具有一定的保护作用。

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引 言

正 文

1 实验材料

1.1 实验动物

1.2主要药品和试剂

1.3主要仪器

2 方法

2.1动物模型的筛选制备和分组

2.2药物干预

2.3主要药物剂量的换算及配制方法:

2.4大鼠行为学的观察

2.5组织化学

2.6图像及统计学分析

3 结 果

3.1抗痫煎剂对PTZ致痫大鼠痫性发作的影响

3.2海马CA1区、CA3区神经细胞病理变化

4 讨论：

4.1PTZ的致痫机制

4.2癫痫与细胞凋亡

4.3细胞凋亡与Bcl-2

4.4中医对癫痫的认识

4.5抗痫煎剂的立法、组方原则及现代药理研究

4.6阳性对照药物的选择

4.7抗痫煎剂对癫痫病的疗效和机理探讨

5 问题与展望

5.1存在的问题

5.2展望

结 论

参考文献

综 述：

致谢

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