安胃汤对大鼠慢性萎缩性胃炎EGF和EGFR表达的PCR研究

摘要

目的:观察安胃汤对慢性萎缩性胃炎大鼠血中表皮生长因子及其受体表达量的影响，从而探讨安胃汤治疗慢性萎缩性胃炎疗效的分子机制，从基因水平上阐释名老中医治疗慢性萎缩性胃炎的学术理论。　　方法:健康清洁级雄性Wistar大鼠84只，体重140~170克，完全随机分为空白对照组（A组）、病理模型组（B组）、安胃汤大剂量组（C组）、安胃汤中剂量组（D组）、安胃汤小剂量组（E组）、维酶素对照组（F组）、胃复春对照组（G组）共七组，每组12只。空白组给予正常饮食进水，其余六组采用甲基硝基亚硝基胍（MNNG）溶液建立慢性萎缩性胃炎大鼠模型。于造模成功后开始，安胃汤大剂量组、安胃汤中剂量组、安胃汤小剂量组、维酶素对照组、胃复春对照组分别给予药物灌胃治疗4周；空白组，病理模型组同时给予每天每只2 ml生理盐水灌胃。各组大鼠禁食12h，将大鼠麻醉，股动静脉取血，ACD抗凝，淋巴细胞分离液分离有核血细胞，提取有核细胞总RNA，经反转录成cDNA，设计合成EGF和EGFR特异性引物，通过real-time PCR的方法检测7组大鼠血中EGF和EGFR基因表达的差异；同时剖腹取胃，沿胃大弯剪开，并向胃窦近幽门口至胃大弯方向取1.0㎝×1.0㎝×0.5㎝胃粘膜组织，臵于10％甲醛固定，作常规石腊包埋切片，做胃黏膜组织病理观察。　　结论:1.胃黏膜大体形态观察：通过观察皱襞多少、走向，黏膜色泽，是否有出血等情况，发现病理模型组皱襞减少或消失，走向紊乱，表面粘液少，黏膜色泽淡白或灰白，且部分伴有散在出血点。经安胃汤大、中、小剂量组，维酶素对照组、胃复春对照组治疗后，胃黏膜损害均有不同程度的改善，以安胃汤大剂量组效果最为明显。2.胃黏膜光学显微镜观察：通过观察胃黏膜上皮细胞排列状况、固有腺体数量，有无炎性细胞浸润等情况，发现病理模型组固有腺体数量明显减少，排列紊乱，有炎性细胞浸润。经安胃汤大、中、小剂量组，维酶素对照组，胃复春对照组治疗后，胃黏膜萎缩有不同程度的逆转，以安胃汤大剂量组效果最为明显。3.病理模型组血清中EGF含量明显高于空白组，两者比较有显著差异（P<0.01）。安胃汤大、中、小剂量组、维酶素对照组、胃复春对照组与病理模型组相比均能明显降低血清中EGF含量，与之比较均有显著差异（P<0.05），说明安胃汤、维酶素对照组、胃复春对照组均能有效调控血清中EGF含量；安胃汤大剂量组EGF值与空白对照组EGF值最为接近，两组比较差异无显著意义（P>0.05）,且安胃汤大剂量组与维酶素对照组、胃复春对照组比较差异有显著意义（P<0.05），安胃汤中、小剂量组与维酶素对照组、胃复春对照组EGF含量比较无显著差异（P>0.05）。4.病理模型组血清中EGFR含量明显高于空白对照组，两者比较有显著差异（P<0.01）。安胃汤大、中、小剂量组、维酶素对照组、胃复春对照组与病理模型组相比均能明显降低血清中 EGFR含量，与之比较有显著差异（P<0.05），说明安胃汤、维酶素对照组、胃复春对照组均能有效调控血清中EGF含量；安胃汤大剂量组EGFR值与空白对照组EGF值最为接近，两组比较差异无显著意义（P>0.05），且安胃汤大剂量组与维酶素对照组、胃复春对照组比较差异有显著意义（P<0.05），安胃汤中、小剂量组与维酶素对照组、胃复春对照组EGFR含量比较无显著差异（P>0.05）。　　结论:1.安胃汤可以调控血液中EGF的表达水平，改善胃黏膜状态，促使胃黏膜修复；2.安胃汤能够显著改善胃黏膜组织病理形态；3.安胃汤可以治疗CAG，其机理可能是通过降低EGF及EGFR在血液中的表达，改善微循环，增加胃黏膜血流量，增强黏膜屏障的防御和修复的功能，从而达到治疗慢性萎缩性胃炎的目的。

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引 言

正 文

1 实验材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

1.3统计分析

2 实验结果

2.1动物外观观察

2.2胃粘膜大体形态观察

2.3胃黏膜光学显微镜观察

2.4 血清中表皮生长因子及其受体含量检测结果

2.5实时荧光定量PCR结果

2.6电泳图片

3 讨论

3.1现代医学对慢性萎缩性胃炎的认识

3.2中医对慢性萎缩性胃炎的认识

3.3中医对慢性萎缩性胃炎的临床认识

3.4中医对慢性萎缩性胃炎的相关动物实验研究

3.5对MNNG大鼠慢性萎缩性胃炎模型的评价

3.6关于表皮生长因子极其受体的讨论

3.7关于RT-PCR的相关问题讨论

3.8 安胃汤理法方药的研究

3.9安胃汤促进胃黏膜逆转机制的探讨

4存在的问题和展望

结 论

参考文献

附录

综 述

致谢

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