复脑灵对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马细胞凋亡的影响

摘要

目的：本实验通过观察复脑灵口服液对血管性痴呆大鼠模型学习记忆功能及海马细胞凋亡的研究，进一步探讨其对神经细胞的保护作用及作用机制。　　方法：采用无创动脉夹反复夹闭颈总动脉结合腹腔注射硝普钠降压的方法制作大鼠拟血管性痴呆动物模型。把50只健康的雌雄各半SD大鼠随机分成5组，假手术组(A组)、模型组(B组)、复脑灵口服液低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组),每组10只，各组大鼠于术后第3天开始给药，每日灌胃给药1次，连续21日。各组于灌胃停止后第二天，采用MWM测试法进行水迷宫实验，及连续5天做定位航行实验(place navigation)，第6天开始做空间探索试验(spacial probe test)，实验结束后断头取脑，应用HE染色查看脑组织，TUNEL技术原位标记凋亡细胞。　　结果：水迷宫定位航行实验显示，模型组逃避潜伏期（escape laten）5天内变化平缓，给药治疗的各组潜伏期随着训练天数的增加而明显缩短，模型组逃避潜伏期与其他各组相比具有显著性差异(P<0.01)。低剂量组、中剂量组、高剂量组逃避潜伏期均值从大到小依次排列，且各给药组两两相邻间比较无显著性差异(P>0.05),不相邻间两组比较有统计学意义(P<0.05)。水迷宫空间探索试验显示，跨平台次数中，各组与模型组比较均有显著性差异(P<0.01)。给药组相邻两组间两两比较，无显著性差异(P>0.05)，而不相邻两组比较具有统计学意义(P<0.05)。　　HE染色后，观察显示：除假手术组和高剂量组外，各组均有不同程度的细胞损坏和萎缩。在大脑皮质、海马区出现了不等量的神经元细胞变性，及细胞死亡。病变神经元细胞体积缩小，核膜核仁模糊不清。　　TUNEL技术原位标记细胞凋亡示：①假手术组偶见TUNEL阳性反应物；②模型组大鼠在海马CA1区可见较多棕黄色TUNEL反应阳性细胞；③复脑灵口服液各组大鼠海马CA1区可见TUNEL反应阳性细胞但较模型组明显减少；④模型组凋亡指数显著高于假手术组(P﹤0.01)。复脑灵口服液组凋亡指数显著低于模型组(P﹤0.01)，而且复脑灵口服液相邻组间两两比较无显著性差异(P>0.05)，不相邻两组比较具有统计学意义(P<0.01)。　　结论：复脑灵口服液对缺血再灌注损伤大鼠的学习和记忆能力方面具有提高和改善作用，对缺血再灌注损伤大鼠脑组织内海马细胞凋亡具有明显的抑制作用。

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引 言

正 文

1 实验材料和方法

1.1实验对象

1.2实验药物

1.3 试剂及仪器

1.4 动物模型制作

1.5 实验分组

1.6 给药方法

1.7 行为学检测

1.8 标本采集及处理

1.9 统计学处理

2 实验结果

2.1 大鼠脑缺血再灌注后神经行为改变

2.2 HE 检测结果观察

2.3 TUNEL 及凋亡指数

3 讨论

3.1 VD 的病名、病因病机、辨证分型及治疗专法的总结探讨

3.2 动物模型的建立及其与 VD、脑组织损伤、神经行为学关系的讨论

3.3 复脑灵口服液的来源、组方、研究进展及其与 VD 的关系

3.4 水迷宫实验与行为学习记忆的关系及其实验结果讨论

3.5 细胞凋亡与 VD、脑组织损伤的关系及其结果讨论

结 论

参考文献

致谢

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