滋肾活血颗粒抗肾纤维化中对β2-MG及TGF-β1干预作用的实验研究

摘要

目的：探讨滋肾活血颗粒防治肾纤维化的机制，为临床治疗与诊断慢性肾功能不全提供实验依据。　　方法：180±10g健康的Wistar大鼠60只，雌雄各半。随机抽取36只，参考文献造模，手术切除右侧肾脏加重复尾静脉注射阿霉素制备肾纤维化大鼠模型。余24只大鼠，假手术组（即行腹腔切开后逐层缝合，不切除右侧肾脏）12只，空白对照组（空白组）12只。术前将造模的36只大鼠随机分为3组：模型对照组（模型组）、中药滋肾活血颗粒治疗组（中药组）、西药卡托普利治疗组（西药组）各12只。同时，术后第7天与第14天分别尾静脉注射阿霉素5mg/kg和3mg/kg。假手术组处理同模型组，每日分别予生理盐水灌胃。空白组不予任何处理，自由饮水和进食。造模三组在重复尾静脉注射阿霉素后，分别开始给予等量的生理盐水、卡托普利溶液和滋肾活血颗粒灌胃治疗。疗程均为8周，实验全过程共11周(含适应性饲养1周)。第11周末，收集24h尿液用于蛋白定量（24hUpro）及尿β2微球蛋白（β2—MG）检测，腹主动脉取血测定肌酐(scr)、尿素氮（BUN）的值。最后，处死大鼠取左肾行组织病理学检查及免疫组化检测转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。　　结果：用药8周后，模型组大鼠Scr、BUN、24hUpro、尿β2—MG水平均较正常对照组明显升高。滋肾活血颗粒治疗组上述指标则较模型组和西药组均有不同程度的改善，差异有统计学意义。肾脏病理显示空白组、假手术组大鼠的肾组织中肾小球、肾小管结构清晰，间质结构正常，两组没有明显差异。模型组大鼠的肾纤维化病理表现明显，中药组大鼠肾组织纤维化病理表现较轻，西药组大鼠肾组织纤维化病理表现较中药组明显。实验结果显示：转化生长因子β1和尿β2微球蛋白仅在空白组、假手术组大鼠的肾小球中有少量表达；模型组表达则明显增加，明显高于其他组；西药组表达较空白组、假手术组均多，但较模型组为少。半定量分析显示空白组、假手术组的转化生长因子β1的表达水平几乎一样，无差异性（P>0.05）。中药组的表达水平又较西药组为低，有显著性差异(P<0.01），与空白组、假手术组比较则没有明显差异（P>0.05）。　　结论：（1）本实验阿霉素大鼠肾病模型建立成功。（2）滋肾活血颗粒能降低24hUpro、Scr，具有保护肾功能的作用，中药组明显优于西药组；但由于样本有限，对BUN影响不明显。（3）滋肾活血颗粒能够明显减轻肾组织的病理损伤程度，其作用机制可能是通过干预TGF-β1的表达有关，从而实现其抗肾纤维化的作用。且尿β2-MG含量于病变肾小管肾间质比率呈正相关，能早期反映肾纤维化的程度。（4）联合TGF-β1、尿β2-MG作为临床上无创性评价肾纤维化的新标准，为临床无创性诊断肾纤维化提供实验依据和新思路。

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引言

正文1.实验材料与方法

1.1实验材料

1.2 实验方法

1.3 标本采集

1.4 标本检测

1.5 统计学处理

2.实验结果

2.1实验期间大鼠死亡情况（表-1） ：

2.2 实验过程大鼠生存质量及体重变化观察

2.3 阿霉素肾病大鼠24小时尿蛋白（24hUpro）、肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）的比较

2.4 阿霉素肾病各组大鼠尿β2—MG的含量的比较

2.5 各组大鼠的肾组织病理形态学观察

2.6 各组大鼠肾组织TGF-β1免疫组化测定

3 讨论

3.1对阿霉素大鼠肾纤维化模型的评价

3.2 阳性对照药物卡托普利的选择依据

3.3 指标选择的依据

3.4 滋肾活血颗粒抗纤维化作用的机理探讨

3.5 肾纤维化病机“血瘀”的现代研究

4. 存在问题与展望

结论

参考文献

附录 1

附录 2

综述

致谢

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