番泻苷A、B对照品的制备及番泻豆荚中番泻苷A、B的含量测定

摘要

目的：采用高效液相色谱法测定几批番泻叶中番泻苷A、B的含量，以含量最高的一批番泻叶为原料，提取对照品番泻苷A、B，并以番泻豆荚为研究对象，建立番泻豆荚中番泻苷A、B含量测定的方法。以证实番泻豆荚中含有与番泻叶相同的泻下有效成分番泻苷A、B，并与叶中二者的含量做比较。　　方法：首先通过对测定条件的优化，采用高效液相色谱法测定番泻叶中番泻苷A、B的含量，以二者含量之和为指标，选出含量最高的一批番泻叶做原料，考察影响提取的各种因素，确定番泻叶中二蒽酮化合物的提取工艺。此工艺为：番泻叶粗粉加入含0.1％碳酸氢钠的30%甲醇溶液采用超声提取方法提取，得提取溶液。提取液浓缩，调pH值5.0，上D101大孔吸附树脂柱，先以水洗，再以30%乙醇洗脱，收集洗脱液，低温浓缩至干，得提取物。进一步将提取液酸化，以正丁醇萃取，得总二蒽酮化合物，经过制备高效液相色谱技术分离纯化，得到对照品番泻苷A、B，其结构经UV、IR、MS等波谱分析，结合文献报道数据确定其结构，并与日本进口的番泻苷A以及中检所购买的番泻苷B作了对照品比对实验。在此基础上，建立番泻豆荚中番泻苷A、B的含量测定方法，采用高效液相色谱法，色谱条件为：采用ODS色谱柱，乙腈：醋酸-0.1mol/L醋酸钠缓冲液(pH5.0)(35:65)，该混合溶液1000ml中，加入四庚基溴化铵2.45g为流动相，检测波长340nm，流速1.0ml/min。测定不同批号的六批番泻豆荚样品中番泻苷A、B的含量，以二者含量之和为指标，与番泻叶中二者的含量做比较。　　结果：自制对照品番泻苷A、B与日本进口的番泻苷A以及中检所购买的番泻苷B的对照品比对实验结果显示，日本进口的番泻苷A纯度为99.697%，自制的番泻苷A纯度为99.510%；中检所购买的番泻苷B纯度为97.883%，自制的番泻苷A纯度为99.557%。本研究还建立了简便、快速的番泻豆荚中番泻苷A、B的含量测定方法。采用高效液相色谱法，测定了六批番泻豆荚中番泻苷A、B的含量，平均回收率：番泻苷A:97.72%，RSD=0.54%；番泻苷B:97.57%，RSD=0.69%。线性范围：番泻苷A:0.482～3.856μg，rA=0.99998；番泻苷B：1.036～8.288μg，rB=0.99996。以番泻苷A、B的含量之和为指标，六批番泻豆荚的含量(mg/g)分别为：26.4039、22.5996、23.6430、25.7697、25.5793、29.0349；而与番泻豆荚样品测定方法完全相同的四批番泻叶的含量(mg/g)为：15.2928、15.1983、13.2134、12.5825，明显低于番泻豆荚中二者的含量之和。　　结论：本课题建立了从番泻叶中提取对照品番泻苷A、B的方法，并建立了采用HPLC法测定番泻豆荚中番泻苷A、B的含量的方法。目前，国内外文献中均未见采用HPLC法测定番泻豆荚中番泻苷A、B含量的报道。本课题研究填补了这一空白，首次采用HPLC法测定了番泻豆荚中番泻苷A、B含量，所建立的方法简便、快速、重现性好，证实了豆荚中含有与叶相同的泻下有效成分番泻苷A、B，且豆荚中二者的含量均高于叶。

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引言

第一部分 番泻叶中番泻苷A、B的含量比较及对照品番泻苷A、B的制备研究

1 番泻叶中番泻苷A、B的含量比较

2 对照品番泻苷A、B的制备

第二部分 番泻豆荚中番泻苷A、B的含量测定

1 仪器与材料

2 色谱条件的选择

3 样品提取条件的考察

4 分析方法学研究

5 样品测定与结果

6 小结与讨论

7 实验创新点与展望

8 结 语

参考文献

综述

致谢

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