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安胃汤对实验性乙酸胃溃疡大鼠胃粘膜SRF表达的影响

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引言

正文1 实验材料和方法

1.1 实验动物

1.2 药物与试剂

1.3 主要仪器设备

1.4 实验动物分组

1.5 造模

1.6 给药

1.7 标本采集及处理

1.8 溃疡指数的测量和计算

1.9 组织学检查及判定标准

1.10 免疫组化染色步骤及结果计算与判断

1.11 统计方法

2 实验结果

2.1动物观察

2.2 胃窦大体形态观察

2.3 HE染色的组织形态结构观察

2.4 溃疡指数的计算

2.5 再生粘膜厚度、粘膜肌层缺损度的测定

2.6 免疫组织化学观察

3 讨论

3.1 古典医籍对胃溃疡的论述

3.2 胃溃疡的中医病因病机

3.3 胃溃疡的中医治疗3.3.1 辨证分型治疗

3.4 中药治疗胃溃疡的现代研究概况

3.5 胃溃疡的病因学和发病机制

3.6 消化性溃疡的西医治疗

3.7 关于QOUH

3.8 关于SRF

3.9 对安胃汤治疗胃溃疡、促进溃疡愈合的认识

3.10 动物模型的讨论

4 存在的问题和展望

结论

参考文献

附录

综述

致谢

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附图

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摘要

目的:通过大鼠乙酸胃溃疡模型、采用免疫组织化学方法实验观察安胃汤对胃溃疡大鼠胃组织SRF(Serum Response Factor)表达的影响,进一步探讨安胃汤治疗慢性胃溃疡和提高胃溃疡愈合质量的作用机制,为安胃汤的进一步开发研究提供实验依据。  方法:清洁级Wistar大鼠50只,雌雄各半,体重180±50g。完全随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、安胃汤大剂量治疗组(C组)、安胃汤小剂量治疗组(D组)、奥美拉唑治疗对照组(E组),共五组,每组各10只。除空白组外,其余大鼠均采用20%乙酸注射法进行胃溃疡造模。造模第3天开始,A组、B组每天以生理盐水灌胃,C组以4g/ml安胃汤药液灌胃,D组以1g/ml安胃汤药液灌胃,E组以0.2mg/ml奥美拉唑胶囊溶液灌胃。灌胃13天后停药,各组大鼠禁食24小时,剖腹取胃,切取含溃疡边缘约3mm组织在内的溃疡组织块,约1.0cm×1.2cm大小,先臵于10%中性甲醛3分钟,计算溃疡指数后再臵于10%中性甲醛中固定24小时。按照常规梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,以瘢痕的最长径为中心,5μm厚度连续切片,分别行HE、免疫组化染色,观察再生粘膜厚度及粘膜肌缺损宽度,免疫组化采用SP法检测,在全自动图像分析系统上,采用MIAS医学图像分析软件进行半定量分析。  结果:1.C、D和E组胃溃疡指数明显低于B组(P<0.01),D组与E组比较差异无显著性意义(P>0.05),C组与E组比较差异有显著意义(P<0.05)。C、D和E组均能较B组明显减少粘膜肌层缺损度、增加再生粘膜厚度(P<0.01),D组与E组比较差异无显著意义(P>0.05),C组与E组比较差异显著(P<0.05)。2. C、D和E组均能较B组明显增加胃溃疡大鼠SRF的阳性区域面积比(P<0.01),D组与E组比较差异无显著意义(P>0.05),C组与D组、E组比较差异显著(P<0.01)。  结论:安胃汤具有促进实验性大鼠胃溃疡愈合的作用,并可明显提高乙酸造模胃溃疡大鼠胃组织SRF的表达。促进上皮细胞再形成及肌肉结构的恢复,这可能是其治疗胃溃疡,提高胃溃疡愈合质量的重要机制之一。在促进大鼠胃组织SRF的表达水平方面,安胃汤大剂量组优于奥美拉唑组,说明安胃汤疗效好于西药奥美拉唑。且安胃汤大剂量组优于安胃汤小剂量组,说明安胃汤的药效具有一定的剂量依赖关系。

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