吗啡依赖大鼠视皮层GABA能系统的变化和形态学研究

摘要

视觉系统中阿片受体广泛分布，长期阿片暴露影响视觉系统神经元的反应特性。探讨阿片滥用对视觉系统的影响对于了解视觉系统中阿片受体的功能以及阿片滥用的系统性作用的神经机制都是非常有意义的。 前期研究发现，慢性给大鼠吗啡给药显著降低外膝体．视皮层通路短时程突触抑制，吗啡再次给药后进一步降低短时程突触抑制。有趣的是，吗啡再次给药3h后短时程突触抑制恢复至正常水平。为了探讨GABA能抑制系统的作用，我们采用电泳法测定比较了吗啡依赖和不同戒断时间大鼠视皮层GABA含量，采用分光光度法测定比较了GABA合成酶谷氨酸脱羧酶与GABA分解酶谷氨酸转氨酶的活性。随后我们通过Golgi-Cox染色研究了吗啡依赖大鼠视皮层第Ⅲ层锥体细胞的形态学变化和免疫荧光化学染色定量分析了吗啡依赖大鼠视皮层各层μ-阿片受体和GABA分布和密度的变化。主要取得以下结果： 1．通过视皮层匀浆液纸电泳法研究比较了吗啡依赖不同时程大鼠视皮层GABA含量的变化。吗啡依赖大鼠视皮层GABA含量与生理盐水处理组相比显著降低(P<0.05)，戒断组大鼠GABA含量升高到盐水对照组水平，再次给药后3h GABA仍然维持在与盐水组一致的水平。 2．研究比较了吗啡依赖不同时程大鼠视皮层谷氨酸脱羧酶和谷氨酸转氨酶活性的变化。吗啡依赖大鼠视皮层谷氨酸脱羧酶活性比对照组有显著性升高(P<0.05)，再次给药后3h大鼠视皮层谷氨酸脱羧酶活性升高，戒断组大鼠视皮层谷氨酸脱羧酶活性有所降低，但无统计学意义。吗啡依赖组、戒断组和再次给药组谷氨酸转氨酶活性均有所下降。 3．对吗啡依赖大鼠与盐水处理大鼠大脑Golgi-Cox 法浸染，Sholl 同心圆法分析的比较表明吗啡依赖大鼠视皮层Ⅲ层锥体细胞树突长度[(568.30±12.69)μm]比对照组[(750.58±61.07)μm]缩短24％。Sholl分析表明吗啡依赖组大鼠树突长度在各个同心圆交点均比对照组短，在6、7级和21～26级交点长度差异显著。对生理盐水组大鼠和吗啡依赖大鼠视皮层Ⅲ层锥体细胞树突二级分支树突棘密度做了比较。与对照组相比[(7.76±2.09)/10μm]，吗啡依赖大鼠视皮层Ⅲ层锥体细胞树突棘密度[(5.66±1.13)/10μm]减少27％。吗啡依赖组大鼠树突棘比对照组变的更短，具短而细的柄和末端球拍状膨大。 4.免疫荧光化学分析发现吗啡依赖大鼠视皮层Ⅰ～Ⅵ层 MOR1 阳性神经元密度比生理盐水对照组显著降低。末次给药10 min后视皮层Ⅰ和Ⅱ～Ⅴ层MOR1密度比吗啡依赖组显著升高，但仍比对照组低。末次给药3 h后，视皮层第Ⅰ和Ⅳ层MOR1密度仍比对照组低。而吗啡戒断组GABA能阳性神经元密度比吗啡依赖组显著降低。提示慢性吗啡依赖后视皮层GABA能神经元的GABA递质合成显著减少。 结论：慢性吗啡给药减弱大鼠视觉系统 GABA 能抑制作用，与其合成酶谷氨酸脱羧酶的活性降低有关。同时，形态学实验验证了吗啡慢性给药引起的突触可塑性变化。吗啡依赖大鼠视皮层神经元的锥体细胞树突分支总长度显著缩短，树突棘显著密度降低。现有的证据显示，阿片受体表达降低，特别是视皮层内GABA 合成减少可能是吗啡依赖导致视皮层神经元功能异常的重要机制，但其他因素的影响亦不能排除。然而，我们目前无法确定的解释为何十天的吗啡处理没有影响大鼠视皮层谷氨酸转氨酶的活性。总的来说，要明白吗啡对视觉系统的影响及其机制仍有许多的工作要做。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

一文献综述：阿片依赖致脑结构及功能变化的研究进展

1药物滥用导致神经结构改变

2神经化学和受体表达的变化

3功能改变

4药物依赖的分子机制

研究背景

二实验研究部分

第一部分：吗啡依赖大鼠视皮层GABA及分解代谢酶变化的研究

1实验动物与材料

2实验方法

3结果

4讨论

第二部分：慢性吗啡处理对大鼠视皮层锥体细胞树突结构的影响

1实验动物与材料

2实验方法

3结果与讨论

4讨论

第三部分：慢性吗啡处理对大鼠视皮层μ-阿片受体和GABA分布的影响

1实验动物与材料

2实验方法

3结果

4讨论

总结和讨论

参考文献

附图

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