前列腺癌细胞系PC--3来源的外泌体对破骨细胞分化的影响及其作用机制的研究

目录

摘要

前言

第一章PC-3外泌体的分离与鉴定

1．1材料与方法

1．1．1细胞来源

1．1．2主要试剂及耗材

1．1．3主要仪器

1．1．5前列腺癌细胞系PC-3细胞的传代

1．1．7透射电镜观察外泌体形态

1．1．8外泌体的粒径分析

1．1．9流式细胞术检测外泌体表面标记

1．1．10统计学分析

1．2实验结果

1．2．1电镜下外泌体的形态

1．2．2外泌体的直径分布

1．2．3流式细胞术鉴定外泌体表面标记

1．3讨论

第二章PC-3外泌体对破骨细胞分化的影响及作用机制

2．1材料与方法

2．1．1主要试剂及耗材

2．1．2主要仪器

2．1．3人原代破骨细胞诱导和外泌体共培养

2．1．4 TRAP染色观察破骨细胞分化情况

2．1．5 qRT-PCR检测破骨细胞相关基因的表达

2．1．6 Wbstern Blot测定破骨细胞相关蛋白的表达

2．1．7统计学分析

2．2实验结果

2．2．2 PC-3来源的外泌体降低破骨细胞分化相关基因mRNA和miR-214的表达水平

2．2．3 PC-3来源的外泌体降低破骨细胞分化相关蛋白的表达水平

2．2．4 PC-3来源的外泌体阻断破骨细胞NF-κB通路的激活

2．3讨论

第三章miR-214转染对破骨细胞分化的影响及作用机制

3．1材料与方法

3．1．1主要试剂及耗材

3．1．2主要仪器

3．1．3人原代破骨细胞诱导培养

3．1．4破骨细胞转染miR-214

3．1．5 TRAP染色观察破骨细胞分化情况

3．2．2下调miR-214降低破骨细胞分化相关基因mRNA的表达水平

3．2．3下调miR-214降低破骨细胞分化相关蛋白的表达水平

3．2．4下调miR-214阻断破骨细胞NF-κB通路的激活

3．3讨论

结论

参考文献

中英文缩略词表

攻读学位期间成果

致谢

声明