三七联合三苯氧胺治疗乳腺癌临床及实验研究

摘要

本文对三七联合三苯氧胺治疗乳腺癌进行了临床及实验研究。本研究分为两个部分：　　第一部分：　　目的：将活血化瘀中药三七与三苯氧胺联合应用于乳腺癌患者，通过对血谷草、谷丙转氨酶定期监测及运用B超对脂肪肝变化及子宫卵巢事件定期评价，探讨三七对乳腺癌患者应用三苯氧胺治疗所导致的相关肝损伤及子宫卵巢事件的影响，为中医药参与乳腺癌内分泌治疗提供新的临床思路。　　方法：将68例符合纳入标准的乳腺癌患者随机分为2组，每组各34例。治疗组采用三苯氧胺+三七片治疗；对照组采用三苯氧胺单药治疗，连续服用12个月。观察指标①肝功能监测：每3个月监测血谷草转氨酶及谷丙转氨酶；②脂肪肝及子宫卵巢事件监测：每3个月以B超评价脂肪肝程度及观察子宫内膜、子宫肌瘤及卵巢囊肿发生变化情况。③安全性观察：观察与三苯氧胺治疗相关心血管疾病、深静脉栓塞等严重不良反应发生情况及乳腺癌复发转移情况　　结果：对肝功能及脂肪肝影响治疗组及对照组治疗第6、12个月谷草转氨酶及谷丙转氨酶较治疗前显著升高（P＜0.05），组间比较显示治疗组的升高均值显著低于对照组，差异有统计学意义。两组治疗12个月肝功能异常人数均较治疗前增加（P＜0.05），对照组增加趋势更加明显，但组间比较未显示出统计学差异。随着三苯氧胺治疗时间的延长，轻、中度脂肪肝发生机会不断升高，对照组升高趋势更加明显，治疗第12个月治疗组发生脂肪肝例数明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。对子宫卵巢事件影响：绝经前女性三苯氧胺影响主要体现在子宫肌瘤及卵巢囊肿增多增大，对子宫肌瘤的影响对照组显示出治疗前后统计学差异（P＜0.05）；而治疗组未显示出治疗前后统计学差异。组间比较未得到统计学意义。绝经后女性三苯氧胺影响主要体现在子宫内膜异常增厚，治疗组及对照组治疗前后比较及组间比较均达到统计学差异(P＜0.05）。安全性评估：两组均无心血管事件及静脉血栓事件等严重不良反应发生。两组患者治疗期间均未出现局部复发和远处转移。　　结论：三七与三苯氧胺联合应用于瘀血内阻型乳腺癌治疗，可能在一定程度上能够有效的保护肝功能，降低脂肪肝发生机会；减缓绝经前女性与三苯氧胺治疗相关的子宫肌瘤产生和增大；对绝经后女性子宫内膜具有一定保护作用，减少子宫内膜异常增生，从而提高治疗依从性。该联合治疗方案在治疗期间未影响三苯氧胺疗效，未出现严重不良反应，安全性好。　　第二部分：　　目的：将不同浓度三七总皂甙和三苯氧胺（TAM）单药或联合应用于乳腺癌MCF-7细胞及T47-D细胞，探讨三七总皂甙和TAM对乳腺癌MCF-7细胞及T47-D细胞增殖及凋亡的影响，联合应用是否具有协同效果及可能的作用机制；同时探讨雌激素受体β（ERβ）在三七总皂甙和TAM治疗中对细胞生长凋亡的影响。　　方法：分别或联合应用不同浓度的TAM、三七总皂甙作用于MCF-7细胞及T47-D细胞，应用四甲基偶氨唑蓝(MTT)比色法分析细胞增殖水平，应用流式细胞技术测定细胞周期分布和凋亡率。　　结果：TAM及三七总皂甙均可有效抑制乳腺癌MCF-7及T47-D细胞生长，抑制作用随浓度增加和时间延长而增强，三苯氧胺（1.5×10-5mol／L）与三种浓度三七总皂甙联合与单药应用相比均可显示出明显的抑制优势；两者均可使 MCF-7细胞周期中Go／G1期细胞含量较空白对照组明显升高；T47D细胞周期中S期细胞含量较空白对照组明显降低；联用方案显示出明显促进细胞凋亡优势。在相同的药物浓度及作用时间下，三苯氧胺及三七总皂甙对ERβ（-）表达的MCF-7细胞生长抑制均显示出比ERβ（+）表达的T47D细胞更明显的抑制优势及促进凋亡优势，该优势随着三七总皂甙及三苯氧胺浓度增加、作用时间延长持续表现；联合用药也得出了类似的结论。三苯氧胺、三七总皂甙单药及联合应用对两个细胞系细胞周期的影响不一致。　　结论：三苯氧胺及三七总皂甙均能有效抑制MCF7及T47D细胞生长，促进其凋零并且显示出时间及浓度依赖。联合方案显示出了良好的协同优势，联合方案疗效普遍优于单药应用。ERβ状况可以影响三苯氧胺、三七总皂甙及两者联合应用的疗效。单药或联合用药对ERβ（-）表达的MCF-7细胞在生长抑制、促进细胞凋零方面均显示出比ERβ（+）表达的T47D细胞更加明显的优势。对细胞周期分析显示，三苯氧胺、三七总皂甙及两者联合应用对细胞周期的影响不一致。因此，影响细胞周期进程是临床疗效产生的基础。

目录

声明

引言

第1章 文献研究

（一）三苯氧胺的临床价值

（二）三苯氧胺的不良反应

1 类似于更年期反应的雌激素缺乏症状

2 三苯氧胺对妇女生殖系统的影响

（三）苯氧胺耐药

1 TAM代谢性耐受

2 TAM有刺激卵巢产生雌激素的作用

3 雌激素受体的突变

4 HER-2基因与三苯氧胺耐药

（四）雌激素受体β（ERβ）与乳腺癌

1 ERβ与乳腺癌发生发展及预后的关系

2 ERβ与乳腺癌内分泌治疗效果的关系

（五）中医对乳腺癌病因病机的认识

（六）血瘀证与乳腺癌发生发展及预后的关系

（七）活血法在乳腺癌治疗中的应用

（八）中医药治疗在乳腺癌内分泌治疗中的作用

（九）三七研究进展

1 三七常见的药效及作用机制

2 三七对血液系统作用

3 三七降脂护肝作用

4 三七对子宫内膜的影响

5 三七抗肿瘤研究

第2章 三七联合三苯氧胺治疗乳腺癌的临床研究

1 临床资料

1.1一般资料

1.2 诊断标准

1.3纳入标准

1.4 排除标准

1.5 剔除标准

1.7 脂肪肝B超诊断及评分标准

1.8 子宫肌瘤及卵巢囊肿评判方法

2 治疗方法

3 观察项目与统计学方法

3.1 观察项目

3.2 统计学方法

4 治疗结果

4.1治疗完成情况及相关原因分析

4.2 治疗前后肝功能及脂肪肝分值变化情况

4.3治疗后2组肝功能异常及脂肪肝发生情况比较

4.4 治疗前后2组脂肪肝评级变化情况比较

4.5治疗前后2组子宫卵巢事件比较

4.6两组子宫肌瘤及卵巢囊肿发生变化情况

4.7 治疗后2组子宫肌瘤、卵巢囊肿发生情况比较

4.8 治疗的安全性及其它不良反应

5 讨论

5.1 三苯氧胺治疗对肝脏的影响

5.2 三七对三苯氧胺治疗相关肝损伤的影响

5.3 三苯氧胺治疗对子宫卵巢影响

5.4 三七对三苯氧胺治疗相关子宫卵巢事件的影响

第3章 三七联合三苯氧胺治疗乳腺癌的实验研究三七总皂甙联合三苯氧胺对MCF7、T47D人乳腺癌细胞生长及凋亡影响

1 材料与仪器

1.1 材料

1.2 仪器

1.3 符号说明

2.2 三七总皂甙对三苯氧胺抑制人乳腺癌MCF7、T47D细胞增殖的影响

2.3 三七总皂甙联合三苯氧胺对人乳腺癌细胞细胞周期和凋亡率的影响

3 统计学方法

4 结果

4.1 各组药物对MCF-7细胞生长抑制的影响

4.2 各组药物对MCF-7细胞周期的影响

4.3 各组药物对MCF-7细胞细胞凋亡的影响

4.4 各组药物对T47D细胞生长抑制的影响

4.5 各组药物对T47D细胞周期的影响

4.6 各组药物对T47D细胞凋亡的影响

4.7 三苯氧胺对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞生长抑制影响比较

4.8三苯氧胺对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞周期影响比较

4.9三苯氧胺对ERβ不同表达MCF-7细胞及 T47D细胞凋亡影响比较

4.10三七总皂甙对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞生长抑制影响比较

4.11 三七总皂甙对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞周期影响比较

4.12三七总皂甙对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞凋亡影响比较

4.13 联合用药对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞生长抑制影响比较

4.14 联合用药对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞周期影响比较

4.15 联合用药对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞凋零影响比较

5讨论

5.1 中医药治疗对乳腺癌MCF-7细胞的影响

5.2 中医药治疗对乳腺癌T47D细胞的影响

5.3 三七总皂甙、三苯氧胺单药或联合应用对乳腺癌MCF7细胞生长与凋亡影响

5.4三七总皂甙、三苯氧胺单药或联合应用对乳腺癌T47D细胞生长与凋亡影响

5.5 三苯氧胺对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞生长与凋亡影响比较

5.6 三七总皂甙对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞生长与凋亡影响比较

5.7 联合用药对ERβ不同表达MCF-7及T47D细胞生长与凋亡影响比较

6 实验结论

结语

不足之处：

参考文献

附录

在校期间发表论文

致谢