红芪总多糖对荷S180瘤小鼠的抑瘤作用及其机制的研究

摘要

目的：研究红芪抗肿瘤的活性成分，提取纯化红芪总多糖(THPS)，明确其结构；观察红芪总多糖单用及与环磷酰胺(CTX)合用对荷瘤小鼠的抑瘤作用，并探讨其机制。 方法：红芪经水提、醇析、酶解和Sevag法除蛋白提取THPS。用高效凝胶过滤色谱法测定THPS的纯度及分子量，用苯酚-硫酸法测定糖含量，用间苯基联苯法测定糖醛酸含量，用气相色谱分析所含单糖组分，明确其结构。昆明种小鼠90只，随机分10只作为正常对照组，另80只小鼠接种S180瘤株后重新随机分为荷瘤对照组、环磷酰胺组、THPS高、中、低不同剂量及各与CTX合用组共8组。正常对照组和荷瘤对照组给予生理盐水，其余各组给与相应剂量THPS及CTX治疗，观察肿瘤的体积变化。14天后处死小鼠，观察瘤重、抑瘤率、胸腺指数和脾指数；血球计数仪检测外周血白细胞、血小板、红细胞及血红蛋白；流式细胞仪检测CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及NK细胞。 结果：1.THPS主要组分的分子量为19kD，纯度为94.3％。2.THPS的糖含量为39.0％，糖醛酸含量为26.5％，单糖组成成分：阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖及葡萄糖，其摩尔比为0.42∶0.53∶0.34∶1.00。 3.所有接种小鼠均有瘤结节生长。4.与正常对照组比较，荷瘤小鼠胸腺指数明显降低(P<0.01.)，脾指数明显增高(P<0.01)，CD4+T细胞明显降低(P<0.01)，CD8+T细胞明显增高(P<0.01)，NK细胞明显降低(P<0.05)。 5.与荷瘤对照组相比，中剂量THPS明显抑制小鼠S180瘤重量的增长(P<0.01)及体积的增加(P<0.05)，抑瘤率达27.81％；增加胸腺指数(P<0.01)和脾指数(P<0.01)，提高CD4+T细胞数量(P<0.05)和NK细胞(P<0.05)。6.与环磷酰胺组相比，THPS与CTX合用后，各剂量组均能明显减轻CTX所致的胸腺指数(P<0.01)、脾指数(P<0.01)、CD4+T细胞(P<0.01)、白细胞(P<0.01)的数量的下降；而只有中剂量的THPS与CTX合用，降低肿瘤的瘤重(P<0.05)，并能明显减轻CTX所致的CD3+T细胞（P<0.01)、CD8+T细胞(P<0.05)和NK细胞(P<0.05)的数量下降。 结论：1.可用水提、醇析、酶解、sevag法除蛋白提取THPS。 2.THPS所含单糖以葡萄糖为主，其次有甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖。3.THPS具有抑制S180瘤生长作用。其抑瘤机制与调节T细胞亚群数量、提高T细胞及NK细胞介导的特异性与非特异性免疫应答有关。4.THPS与CTX合用后，能明显增强抑瘤效果，并减轻细胞毒药物CTX所致的机体特异性及非特异性免疫抑制，缓解骨髓抑制程度，增强机体的抗肿瘤能力。5.THPS的抑瘤作用与其剂量有关，中剂量(200mg/kg.d)效果最佳。

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前 言

文献回顾

实验一 红芪多糖的提取纯化与结构分析

（一）材料、试剂与仪器

（二）实验方法与结果

（三）讨论

实验二 红芪总多糖体内抗肿瘤的实验研究

1.实验材料与方法

2实验结果

3讨论

结 论

参考文献

附 图

在学期间的研究成果

致 谢