声明
缩略词表
前言
1 甘蔗的研究背景
1.1 甘蔗的生物学特征
1.2 甘蔗的起源与分类
1.3 糖的生物学意义
2 糖转运蛋白的研究进展
2.1 糖转运蛋白概述
2.2 糖转运蛋白基因家族的研究进展
3 基因的表达调控机制
3.1 基因的表达调控概述
3.2 转录因子概述
4 本研究的目的及意义
第一章 甘蔗热带种糖转运蛋白基因超家族的鉴定、演化及表达谱分析
1 实验材料
2 实验方法
2.1 比较基因组学方法预测甘蔗热带种糖转运蛋白基因超家族
2.2 甘蔗糖转运蛋白基因超家族系统进化树的构建
2.3 甘蔗糖转运蛋白基因结构的绘制
2.4 甘蔗热带种糖转运蛋白基因表达谱的绘制
3 结果与分析
3.1 甘蔗热带种糖转运蛋白基因超家族的鉴定
3.2 甘蔗糖转运蛋白基因超家族的演化及基因结构分析
3.3 甘蔗糖转运蛋白基因超家族的表达谱分析
4 讨论与小结
第二章 甘蔗糖转运蛋白基因在酵母中的异源功能验证
1 实验材料
2 实验试剂和仪器
2.1 实验试剂
2.2 实验仪器
3 实验方法
3.1 甘蔗叶片总RNA的提取
3.2 cDNA的合成
3.3 甘蔗糖转运蛋白基因cDNA的克隆
3.4 PCR产物的回收
3.5 Gateway技术构建酵母表达载体
3.6 突变型酵母EBY.VW4000感受态细胞的制备
3.7 转化酵母感受态细胞及验证
3.8 缺陷型酵母的糖吸收功能互补实验
4 结果与分析
4.1 酵母表达载体转化EBY.VW4000的验证
4.2 糖吸收功能互补实验
5 讨论与小结
第三章 酵母单杂系统筛选调控甘蔗糖转运蛋白基因的转录因子
1 实验材料
2 实验试剂和仪器
2.1 实验试剂
2.2 实验仪器
3 实验方法
3.1 甘蔗糖转运蛋白基因上游调控序列的分析
3.2 甘蔗糖转运蛋白基因上游目的片段的克隆
3.3 上游目的片段诱饵载体的构建
3.4 诱饵载体转化Y1H-Gold酵母感受态细胞及验证
3.5 自激活检测
3.6 单杂文库筛选
3.7 筛库酵母质粒的提取及测序
4 结果与分析
4.1 甘蔗糖转运蛋白基因上游顺式元件的预测
4.2 诱饵载体转化Y1H-Gold酵母的验证
4.3 自激活检测
4.4 酵母单杂筛库结果
5 讨论与小结
第四章 候选调控转录因子表达谱及蛋白组分析
1 实验材料试剂及仪器
2 实验方法
2.1 单杂获得的互作蛋白基因中转录因子的预测
2.2 单杂获得的互作蛋白基因表达谱分析
2.3 单杂获得的互作蛋白基因蛋白组分析
3 结果与分析
3.1 糖转运蛋白互作蛋白中转录因子的预测
3.2 糖转运蛋白互作蛋白的表达谱分析
3.3 糖转运蛋白相关互作转录因子的蛋白组分析
4 讨论与小结
总结与展望
参考文献
附录
攻读硕士期间的学术论文与研究成果
致谢
福建农林大学;
