索拉非尼对高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2的鼻咽癌细胞杀伤敏感性的影响的研究

摘要

目的 探讨索托非尼提高高表达三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(简写作ABCG2High细胞)对同种异体反应性自然杀伤Allo-NK)细胞的杀伤敏感性及其相关机制.方法 利用免疫磁珠技术分离ABCG2HighCNE2/DDP和Allo-NK细胞,并设3个实验组:①处理组(经索拉非尼10ng/ml共孵育4h的ABCG2HighCNE2/DDP细胞);②未处理组(常规培养的ABCG2HighCNE2/DDP细胞);③对照组(常规培养的K562细胞).流式细胞技术检测处理组和未处理组细胞的ABCG2表达率和5种NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)的表达率.乳酸脱氢酶(LDH)释放测定法检测Allo-NK细胞对各实验组细胞的杀伤率.结果 分离后的CNE2/DDP细胞的ABCG2表达率为91.40%±2.32%,分选出的CD3-CDl6+CD56+ (Allo-NK)细胞纯度大于90%.未处理组的ABCG2 HighCNE2/DDP细胞的NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率分别为2.92%±0.33%、4.27%±0.33%、5.80%±0.62%、11.10%±3.15% 、7.75%±1.14%,而处理组明显升高(分别为10.38%±1.23%、10.68%±1.26%、11.62%±1.22%、43.24%±4.42%、11.91%±0.88%;P<0.05).在效靶比为10:1、20:1时,Allo-NK细胞对未处理组靶细胞的杀伤率为15.32%±1.34%、27.26%±6.81%,而对处理组靶细胞杀伤率为27.75%±4.12%、43.17%±5.92%,两组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 索托非尼通过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体,使其对AIIo-NK细胞的杀伤敏感性增强.