蜜蜂球囊菌几丁质酶纯化及酶学性质的研究

摘要

蜜蜂白垩病(bee chalkbrood disease)是由蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apisOlive＆Spiltoir)引起的蜜蜂幼虫的真菌传染病。目前为止，还没有治疗该病的有效方法。在无法控制的条件下，该病仍呈自然流行状态。几丁质酶在昆虫病原真菌的入侵中有重要作用。我们从10株蜜蜂球囊菌中筛选出一株高产几丁质酶的菌株，并且对其几丁质酶进行了诱导、分离、纯化和酶学性质的研究。经过硫酸铵盐析、SephadexG-75凝胶层析、DE-52离子交换层析得到纯化倍数为6.7的几丁质酶。该几丁质酶的最适反应温度为40℃，在35℃～45℃之间能保持40％以上的活力，但是这种几丁质酶对高温比较敏感；在pH7.5时，蜜蜂球囊菌几丁质酶的活性最高，在pH4.5以下几乎检测不到活力，在pH9.0以上酶活力在20％以下，在pH6～9范围内几丁质酶活力都在40％以上；在0～100mmol/L范围内，一价金属离子Na<'+>、K<'+>对几丁质酶活力影响均表现为先促进后抑制；在浓度为1～10mmol/L范围内，二价金属离子Mg<'2+>、Mn<'2+>对其活力起抑制作用，zn<'2+>对几丁质酶活力基本没有影响，ca<'2+>、Fe<'2+>对几丁质酶活力起促进作用；在浓度1～10mmol/L范围内，三价金属离子Al<'2+>对蜜蜂球囊菌几丁质酶活力起促进作用，Fe<'2+>对几丁质酶活力基本没有影响。

目录

声明

摘要

第一部分文献综述

1蜜蜂白垩病研究进展

1.1病原学研究进展

1.2症状及诊断

1.3病理学研究

1.4流行病学的研究进展

1.5白垩病预防与防治研究进展

2几丁质酶及其在昆虫病原真菌侵染过程中作用

2.1几丁质酶简介

2.2几丁质酶在昆虫病原真菌侵染过程中作用

2.3微生物几丁质酶的应用

第二部分实验部分

1产几丁质酶蜜蜂球囊菌菌株的筛选

1.1材料和方法

1.2结果与讨论

2蜜蜂球囊菌产几丁质酶特性的研究

2.1材料和方法

2.2结果与讨论

3几丁质酶的诱导、分离和纯化

3.1材料和方法

3.2结果与讨论

4不同因素对几丁质酶活力的影响

4.1材料和方法

4.2结果与讨论

参考文献

致谢