β--连环蛋白通过影响核心启动子活性抑制乙型肝炎病毒的复制和表达

目录

声明

符号说明

前言

1.材料与方法

1.1材料

1.1.1 质粒DNA

1.1.2 细胞

1.1.3 siRNAs的合成

1.1.4 双荧光素酶报告基因

1.1.5 引物

1.1.6 抗体与试剂

1.1.7主要仪器设备

1.2方法

1.2.1细胞转染质粒

1.2.2细胞转染siRNA

1.2.3质粒转化和提取

1.2.4细胞总RNA提取（Trizol法）

1.2.5提HBV复制中间体

1.2.6 qPCR

1.2.7提取细胞蛋白

1.2.8 Western Blot

1.2.9细胞免疫荧光技术

1.2.10双荧光素酶检测

1.3统计方法

2.结果

2.1 表达HBV的肝癌细胞中β-catenin水平增加

2.1.1稳定表达HBV的肝癌细胞中β-catenin水平增加

2.1.2瞬时表达HBV的肝癌细胞中β-catenin水平增加及定位改变

2.2 敲减或过表达β-catenin水平对HBV复制的影响

2.2.1敲减HepG2.2.15细胞中β-catenin后HBV复制表达上调

2.2.2过表达β-catenin抑制HepG2.2.15细胞中HBV复制

2.3 LiCL通过增加β-catenin水平抑制HBV复制

2.3.1 LiCL激活Wnt/β-catenin信号通路

2.3.2 LiCL可浓度依赖性下调HBV复制水平

2.3.3 LiCL抑制HBV复制水平的时间效应

2.4 iCRT14下调β-catenin促进HBV复制与表达

2.4.1 iCRT14抑制Wnt/β-catenin信号通路

2.4.2 iCRT14浓度依赖性促进HBV复制

2.5 β-catenin影响HBV启动子CP的活性

2.5.1 沉默β-catenin基因促进HBV启动子CP的活性

2.5.2 序列分析发现HBV启动子CP中存在β-catenin的结合序列

2.5.3 LiCL可抑制CP启动子和EnhⅡ增强子活性，而iCRT14可促进CP启动子和EnhⅡ增强子活性

3.讨论

参考文献

文献综述:β-catenin的基础知识及其在疾病中的作用

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文