基于RCA和CRISPR/Cas9的胞外囊泡内miRNA多重检测技术研究

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第一章 绪 论

1.1 MiRNAs在生理和病理过程中的重要作用

1.2 胞外囊泡和胞外囊泡内miRNAs与疾病诊断

1.3 常规miRNA检测技术及其优缺点

1.3.1 Northern Blotting

1.3.2 MiRNA微阵列

1.3.3 RT-qPCR

1.4 RCA技术的应用与发展

1.5 CRISPR/Cas技术的应用与发展

1.6 本章小结

第二章 RACE检测平台用于胞外囊泡内miRNAs多重检测

2.1 前言

2.2 实验方法

2.2.1 实验试剂

2.2.2 实验仪器

2.2.3 探针设计

2.2.4 Cas9蛋白的提取与表征

2.2.5 RACE可行性验证实验

2.2.6 PAGE电泳表征

2.2.7 体外荧光表征

2.2.8 RACE多靶标验证实验

2.2.9 细胞培养实验

2.2.10胞外囊泡提取实验

2.2.11 胞外囊泡表征

2.2.12 胞外囊泡内miRNAs提取实验

2.2.13 细胞转染实验

2.2.14 RT-qPCR验证

2.2.15 临床样本验证实验

2.2.16 数据处理方法

2.2.17 伦理申明

2.3 结果与讨论

2.3.1 RACE单靶标检测原理

2.3.2 RACE用于单靶标miRNA检测的结果

2.3.3 RACE多靶标检测原理及其结果

2.3.4 RACE用于胞外囊泡内多靶标miRNA检测的结果

2.3.5 RACE与金标准RT-qPCR方法的比较

2.3.6 RACE用于临床样本检测的结果

2.4 特色与创新

第三章 结 论

参考文献

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