血浆及外周血单个核细胞microRNA在精神分裂症诊断中的研究

摘要

目的：通过对精神分裂症患者及健康对照者之间血浆及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)微小RNA(microRNA， miRNA)的表达水平的研究，探索血浆及PBMC中miRNA在精神分裂症患者及正常对照者之间的差异表达，建立精神分裂症特征性 miRNA联合诊断模型，判断 miRNA在中国人群精神分裂症患者中的诊断价值。比较血浆及PBMC中miRNA表达水平的差异性，以及各自在精神分裂症中的诊断价值。　　方法:1).根据文献报道筛选出与精神分裂症相关的7种miRNA(has-mir-449a, has-mir-34a-5p, has-mir-652-3p, has-mir-564, has-mir-432-5p, has-mir-548d-5p和has-mir-572)，收集初诊的精神分裂症患者抗凝全血35例作为疾病组，于体检中心筛选出15名健康体检者的抗凝全血样本作为对照组，标本采集后1小时内分离血浆及PBMC(-80℃冷冻保存)。2).通过查询文献及数据库得到miRNA序列，委托四川爱奇生物技术有限公司对7种引物进行合成、纯化和鉴定。3).提取血浆及 PBMC中的 RNA，采用real-time RT-PCR技术对精神分裂症患者及健康对照者血浆及 PBMC中miRNA进行测定。4).收集与整理实验结果。5).统计分析与精神分裂症诊断模型的建立，验证检测其检验效能，并得出方法学评价结果。　　结果：疾病组血浆及PBMC中7种miRNA中的4种较对照组表达增加,差距有统计学意义（P<0.05），另外3种miRNA的表达量无明显差距（P>0.05）。将差距表达的4种miRNA建立精神分裂症的联合诊断模型，其血浆ROC曲线下面积为98％，PBMC的ROC曲线下面积为86%。疾病组中血浆7种 miRNA的表达量均高于 PBMC，差距有统计学意义（P<0.05）。疾病组血浆及PBMC中7种miRNA的表达水平与年龄无明显相关性（P>0.05）。　　结论：综上所述，miRNA可用于精神分裂症的诊断，血浆及 PBMC取材方便，且miRNA的表达量稳定，故血浆及PBMC中的miRNA可能成为新一代的精神分裂症血液诊断标志物。

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前言

1 精神分裂症的概述及其诊断研究现状

2 血浆微小RNA是良好的疾病的诊断标志物

3 七个外周血单个核细胞miRNA可能用于精神分裂症诊断

4 血浆miRNA在精神分裂症诊断中潜在的优势

5 精神分裂症患者血浆及PBMC中miRNA的研究

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验的主要试剂

3 主要仪器和耗材

4 实验方法

结果

1 RNA提取物的质量检测结果

2 PCR反应的扩增曲线及熔解曲线

3实验结果收集与整理

4 统计学分析

讨论

1 精神分裂症诊断标志物研究

2 外周血循环miRNA在疾病诊断中的研究

3 外周血miRNA在精神分裂症诊断中的研究

4 差异表达的miRNA与精神疾病的关系

5 研究结果差异性的原因

结论

参考文献

汉英缩略词对照表

致谢

综述：微小RNA与精神分裂症及其治疗的研究进展

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