苹果U6启动子的克隆及转录活性分析

目录

声明

主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 基因组编辑体系

1.1.1 CRISPR/Cas9的原理

1.1.2 CRISPR/Cas9的发展

1.1.3 CRISPR/Cas9中的启动子

1.2 植物启动子简介

1.2.1 启动子的结构

1.2.2 启动子的类别

1.2.3 人工启动子

1.2.4 启动子的功能研究

1.3 U6启动子

1.3.1 U6启动子的序列特征

1.3.2 U6启动子的功能特性

1.3.3 U6启动子的可修饰特性

1.4 U6启动子在CRISPR/Cas9体系中的应用

1.5 本研究的目的意义及研究内容

1.5.1 目的意义

1.5.2 研究内容

第二章 苹果U6启动子克隆及活性分析

2.1 材料与方法

2.1.1 试验材料、试剂及仪器设备

2.1.2 ‘金冠’苹果基因组DNA提取

2.1.3 苹果U6启动子克隆

2.1.4 苹果U6启动子生物信息分析

2.1.5 苹果U6启动子表达载体构建

2.1.6 本氏烟草和苹果愈伤组织中的瞬时表达

2.2 结果与分析

2.2.1 MdU6启动子序列分析

2.2.2 MdU6启动子扩增产物鉴定

2.2.3 MdU6启动子转录活性分析

2.3 讨论与小结

2.3.1 讨论

2.3.2 小结

第三章 序列长度对苹果U6启动子转录活性的影响

3.1 材料与方法

3.1.1 MdU6-10-Ps和AtU6-1P的克隆

3.1.2 MdU6-10-Ps及AtU6-1P的表达载体构建

3.1.3 MdU6-10-Ps和AtU6-1P的转录活性分析

3.2 结果与分析

3.2.1 MdU6-10P序列元件分析

3.2.2 MdU6-10P不同长度截短

3.2.3 MdU6-10-Ps的扩增产物鉴定

3.2.4 MdU6-10-Ps转录活性分析

3.2.5 MdU6-10-3P和AtU6-1P转录活性比较

3.3 结论与讨论

3.3.1 讨论

3.3.2 小结

第四章 结论

参考文献

附录A

致谢

作者简历