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H7N9禽流感荧光报告病毒的构建及初步应用

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第一章 绪论

1.1流感病毒的概述

1.1.1 流感病毒的形态与分型

1.1.2 流感病毒的基因组结构与功能

1.1.3 流感病毒的复制过程

1.2 H7N9流感病毒研究进展

1.2.1 H7N9流感病毒的发生和发展

1.2.2 H7N9流感防控现状

1.3 荧光报告病毒的应用

1.3.1 报告基因的起源

1.3.2 荧光报告病毒的发展和应用

1.3.3 荧光报告病毒的优势

1.4 GSDME分子的介绍

1.4.1 Gasdermin蛋白家族简介

1.4.2 GSDMD分子的研究进展

1.4.3 GDSME分子的研究进展

1.5 本研究的目的意义

第二章 H7N9报告病毒的构建及小鼠致病性的评估

2.1 材料与方法

2.1.1 病毒与细胞

2.1.2 鸡胚及实验动物

2.1.3 主要试剂

2.1.4 主要实验仪器

2.2 实验方法

2.2.1重组质粒pHH21-NS-Venus/Apple的构建

2.2.2 8个重组质粒的构建

2.2.3 报告病毒的拯救

2.2.4 报告病毒传代稳定性的鉴定

2.2.5 报告病毒mSD008-627K-Venus/Apple体外复制情况鉴定

2.2.6报告病毒的小鼠致病力实验

2.2.7 mSD008-627K-Venus报告病毒的噬斑实验

2.2.8 mSD008-627K-Venus报告病毒感染小鼠肺脏细胞流式实验

2.3 实验结果

2.3.1重组质粒pHH21-NS-Venus/Apple与8个重组质粒的构建与鉴定

2.3.2报告病毒的拯救

2.3.3 SD008-627E-Venus/Apple报告病毒在鸡胚内正常传代

2.3.4 SD008-627K-Venus/Apple报告病毒在小鼠体内正常传代

2.3.5报告病毒mSD008-627K-Venus/Apple体外复制结果

2.3.6 报告病毒对小鼠的致病性结果

2.3.7 mSD008-627K-Venus噬斑实验结果

2.3.8 mSD008-627K-Venus报告病毒感染小鼠肺脏细胞流式结果

2.4讨论

第三章 GSDME分子影响H7N9流感病毒的复制过程

3.1材料与方法

3.1.1病毒和细胞

3.1.2 主要试剂

3.1.3主要仪器

3.2实验方法

3.2.1质粒和细胞系的构建

3.2.2干扰实验

3.2.3 流式实验

3.2.4细胞核提取实验

3.2.5共聚焦实验

3.2.6 Western blotting实验

3.2.7 荧光定量PCR实验

3.3实验结果

3.3.1 GSDME分子影响mSD008-627K-Venus病毒在细胞内的复制

3.3.2 GSDME分子影响mSD008-627K-Apple病毒在细胞内的复制

3.3.3 GSDME分子不影响VSV病毒在细胞内复制

3.3.4剪切后的GSDME分子聚集在核膜上

3.3.5 GSDME分子促进病毒在细胞核内的复制

3.4讨论

第四章 全文结论

致谢

参考文献

作者简历

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著录项

  • 作者

    于晓菲;

  • 作者单位

    中国农业科学院;

  • 授予单位 中国农业科学院;
  • 学科 预防兽医学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 姜永萍;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
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