大丽轮枝菌CFEM类小分子富含半胱氨酸蛋白家族基因功能研究

目录

声明

主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 引言

1.2 植物与病原菌互作

1.2.1 植物与病原物互作机制

1.2.2 病原相关分子模式

1.2.3 PAMPs激发植物PTI

1.2.4效应蛋白诱导植物ETI

1.2.5效应蛋白抑制植物PTI

1.3 分泌蛋白研究进展

1.3.1 病原菌分泌蛋白研究进展

1.3.2 小分子富含半胱氨酸蛋白研究进展

1.3.3 CFEM结构域蛋白研究进展

1.4 大丽轮枝菌致病机理研究进展

1.4.1 大丽轮枝菌的侵染及危害

1.4.2 大丽轮枝菌的致病机理

1.5 本研究目的及意义

第二章 大丽轮枝菌小分子富含半胱氨酸蛋白（SCRPs）的鉴定及分析

2.1 实验材料、试剂和仪器

2.1.1 实验材料

2.1.2 主要试剂

2.1.3 主要仪器

2.2 实验方法

2.2.1 大丽轮枝菌SCRPs基因预测

2.2.2 大丽轮枝菌SCRPs基因克隆

2.2.3 大丽轮枝菌SCRPs基因瞬时表达载体构建

2.2.4 农杆菌感受态制备及转化

2.2.5 农杆菌介导本氏烟草叶片瞬时转化

2.3 实验结果

2.3.1 大丽轮枝菌SCRPs基因预测及基本特性分析

2.3.2 大丽轮枝菌SCRPs蛋白诱导细胞坏死功能鉴定

2.3.3 大丽轮枝菌SCRPs蛋白抑制细胞坏死功能鉴定

2.3.4 抑制坏死SCRPs蛋白的广谱抑制性鉴定

2.4 分析讨论

第三章 大丽轮枝菌CFEM类SCRPs蛋白抑制坏死功能鉴定

3.1 实验材料、试剂和仪器

3.1.1 实验材料

3.1.2 主要试剂

3.1.3 主要仪器

3.2 实验方法

3.2.1 CFEM类SCRPs蛋白预测

3.2.2 CFEM类SCRPs蛋白广谱抑制性鉴定实验

3.2.3 Western blot检测蛋白表达

3.3 实验结果

3.3.1 CFEM类SCRPs蛋白基本特性分析

3.3.2 CFEM类SCRPs蛋白广谱抑制性分析

3.3.3 CFEM类SCRPs蛋白SCR76和SCR77广谱抑制性鉴定

3.4 分析讨论

第四章 CFEM类SCRPs蛋白SCR76和SCR77抑制植物免疫功能分析

4.1 实验材料、试剂和仪器

4.1.1 实验材料

4.1.2 主要试剂

4.1.3 主要仪器

4.2 实验方法

4.2.1 信号肽活性检测

4.2.2 亚细胞定位分析

4.2.3 洋葱表皮定位分析

4.2.4 烟草叶片DAB染色观察

4.2.5 电解质渗漏检测

4.2.6 烟草抗性相关基因表达检测

4.2.7 关键位点的预测及点突变

4.2.8 转基因烟草的获得

4.2.9 灰葡萄孢接种实验

4.3 实验结果

4.3.1 SCR76和SCR77信号肽活性及功能分析

4.3.2 SCR76和SCR77定位分析

4.3.3 SCR76和SCR77关键功能结构域和位点分析

4.3.4 SCR76和SCR77抑制植物免疫反应分析

4.3.5 SCR76和SCR77调控植物易感性分析

4.4 分析讨论

第五章 大丽轮枝菌CFEM类SCRPs蛋白毒力功能分析

5.1 实验材料、试剂和仪器

5.1.1 实验材料

5.1.2 主要试剂

5.1.3 主要仪器

5.2 实验方法

5.2.1 棉花和烟草诱导条件下CFEM类SCRPs基因的表达模式测定

5.2.2 大丽轮枝菌敲除突变体的构建

5.2.3 大丽轮枝菌功能回补突变株的构建

5.2.4 生长表型观察

5.2.5 大丽轮枝菌接种棉花和烟草致病表型鉴定

5.3 实验结果

5.3.1 CFEM类SCRPs基因表达模式分析

5.3.2 CFEM类SCRPs基因敲除突变体形态学特征

5.3.3 CFEM类SCRPs基因敲除突变体致病性分析

5.3.4 SCR76和SCR77功能位点突变回补转化株致病表型分析

5.3 分析讨论

第六章 全文总结及展望

全文总结

展望

参考文献

附 录

致 谢

作者简历