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【6h】

铁氧还蛋白调控水稻光合电子传递的分子机理研究

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目录

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主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 Fd的多样性

1.2 Fd参与光合电子传递

1.2.1 Fd参与线性光合电子传递

1.2.2 Fd参与循环光合电子传递

1.3 Fd依赖的代谢过程

1.3.1 Fd对光依赖的酶活性的调节

1.3.2 Fd参与碳同化

1.3.3 Fd参与氮同化

1.3.4 Fd参与硫同化

1.3.5 Fd参与叶绿素合成与降解

1.3.6 Fd参与光敏素合成

1.3.7 Fd参与脂肪酸合成

1.4 Fd在植物抵御逆境胁迫中的作用

1.4.1 Fd参与植物抵御病害胁迫

1.4.2 Fd参与过量活性氧的清除

1.5 本研究的目的和意义

第二章 材料与方法

2.1实验材料与药品

2.2实验方法

2.2.1多重比较与进化树构建

2.2.2水稻原生质体提取及蛋白亚细胞定位

2.2.3 RNA提取、cDNA第一链的合成和RT-qPCR

2.2.4原核蛋白表达、纯化

2.2.5细胞色素c及NADP+光还原实验

2.2.6铁氧还蛋白依赖的亚硝酸还原酶实验

2.2.7铁氧还蛋白依赖的亚硫酸还原酶实验

2.2.8 CRISPR-Cas9载体构建及转基因植株基因型鉴定

2.3.9 OsFd1过表达转基因植株的获得与鉴定

2.2.10大肠杆菌质粒提取

2.2.11大肠杆菌与农杆菌转化

2.2.12水稻遗传转化

2.2.13水稻基因组DNA提取

2.2.14水稻叶片叶绿素含量测定及透射电镜观察

2.3.15水稻叶片叶绿体提取

2.3.16水稻叶片叶绿体中NADPH含量测定

2.3.17葡萄糖,淀粉和可溶性总糖含量测定

2.3.18葡萄糖处理

2.3.19叶绿素荧光参数测定

2.3.20水稻叶片总蛋白及叶绿体蛋白提取

2.3.21 Western Blot步骤

第三章 结果与分析

3.1 Fd1是水稻中主要的叶型铁氧还蛋白

3.1.1 Fd1的生物信息学分析

3.1.2 Fd1是水稻中主要的光合型Fd

3.2 Fd1参与水稻光合电子传递

3.3 Fd1在水稻叶绿体中行使功能

3.4 Fd1功能受损导致突变体苗期致死

3.4.1利用CRISPR/Cas9技术构建Fd1功能丧失突变体

3.4.2 Fd1突变后导致突变体在三叶期黄化致死

3.5 fd1突变体中的叶绿体数量和形态受到影响

3.6 Fd1突变体蛋白ΔFd1丧失电子传递能力

3.7 fd1突变体中NADPH含量减少

3.8 Fd1影响水稻碳同化

3.8.1 Fd1突变后对碳同化相关基因表达的影响

3.8.2 Fd1突变后对卡尔文循环相关酶活的影响

3.8.3 Fd1功能的丧失对碳水化合物合成的影响

3.8.4外施葡萄糖对fd1突变体表型的影响

3.9 Fd1和FdC2在水稻中存在协同关系

3.9.1 fd1突变体中Fd依赖基因的表达受到影响

3.9.2 hdy1突变体中Fd依赖基因的表达受到影响

第四章 讨论

4.1 Fd1是主要的光合型Fd,参与水稻光合电子传递和碳同化

4.2在Fd1缺陷的情况下,Fd3和Fd5可以部分缓解PSI受体的限制

4.3水稻中存在两个光合型Fd蛋白

4.4 Fd在拟南芥和水稻中的功能不同

第五章 全文结论

参考文献

附录

致谢

作者简历

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著录项

  • 作者

    赫磊;

  • 作者单位

    中国农业科学院;

  • 授予单位 中国农业科学院;
  • 学科 作物遗传育种
  • 授予学位 博士
  • 导师姓名 钱前;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 TB3R73;
  • 关键词

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