新城疫病毒通过内质网压力应激反应诱导细胞凋亡研究

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英文缩略表

第一章 引 言

1 .1新城疫病毒概述

1 .2内质网应激反应

1.2.1 内质网应激反应概述

1.2.2 未折叠蛋白反应

1.2.3 细胞凋亡

1.2.4 拮抗内质网应激的相关分子

1.2.5 内质网应激反应与病毒感染

1.3总结

1.4 本研究的目的与意义

第二章 新城疫病毒感染通过CHOP信号通路介导细胞凋亡研究

2.1 材料和方法

2.1.1 毒株和细胞系

2.1.2 抗体与试剂

2.1.3 主要缓冲液及试剂配制

2.1.4 主要仪器

2.1.5 CHOP真核表达质粒构建

2.1.6Western Blot检测NDV感染后细胞内CHOP及其它相关蛋白的变化

2.1.7免疫荧光实验检测NDV感染后CHOP细胞定位

2.1.8 病毒TCID50 测定

2.2 实验结果

2.2.1 NDV感染诱导CHOP蛋白表达

2.2.2 NDV感染下调抗凋亡蛋白BCL-2和MCL-1

2.2.3 干扰CHOP对BCL-2蛋白家族及细胞凋亡影响

2.2.4 外源表达CHOP对BCL-2家族蛋白及细胞凋亡影响

2.2.5 NDV感染激活MAPKs和AKT通路

2.2.6 CHOP增强p38/JNK激活，抑制AKT活化

2.3 讨论

2 .4 小结

第三章 新城疫病毒感染通过IRE1α-XBP1信号通路介导细胞凋亡研究

3.1 材料和方法

3.1.1 毒株和细胞系

3.1.2 抗体与试剂

3.1.3 主要缓冲液及试剂配制

3.1.4 主要仪器

3.1.5 IRE1α和XBP1真核表达质粒构建

3.1.6实时荧光定量PCR试验检测IRE1及其下游基因变化

3.1.7 PCR检测NDV感染对XBP1u和XBP1s mRNA影响

3.1.8 间接免疫荧光实验检测NDV感染后XBP1细胞定位

3.1.9NDV感染细胞上清病毒TCID50 测定

3.1.10 转染方法

3.2 实验结果

3.2.1 NDV感染激活IRE1α

3.2.2 干扰IRE1α对病毒复制及细胞凋亡影响

3.2.3 外源表达IRE1α对病毒复制及细胞凋亡影响

3.2.4 NDV感染激活IRE1α-XBP1信号通路

3.2.5 IRE1α调控XBP1s的转录表达

3.2.6 XBP1促进NDV感染诱导的细胞凋亡

3 .3 讨论

3 .4小结

第四章 新城疫病毒感染通过IRE1-TXNIP信号通路介导细胞凋亡研究

4.1 材料与方法

4.1.1 毒株和细胞系

4.1.2 抗体与试剂

4.1.3 主要缓冲液及试剂配制

4.1.4 主要仪器

4.1.5 TXNIP真核表达质粒构建

4.1.6实时荧光定量PCR试验检测相关细胞因子变化

4.1.7PCR检测NDV感染对TXNIP1和TXNIP2 mRNA影响

4.1.8间接免疫荧光实验检测NDV感染后TXNIP细胞定位

4.1.9 转染方法

4.2 实验结果

4.2.1 NDV感染调控TXNIP转录、表达

4.2.2 NDV感染通过IRE1α调控TXNIP表达

4.2.3 TXNIP对病毒复制及细胞凋亡影响

4 .3 讨论

4 .4 小结

第五章 新城疫病毒感染通过J NK信号通路介导细胞凋亡研究

5.1 材料与方法

5.1.1 毒株和细胞系

5.1.2 抗体与试剂

5.1.3 主要缓冲液及试剂配制

5.1.4 主要仪器

5.1.5实时荧光定量PCR试验检测细胞因子变化

5.1.6间接免疫荧光实验检测NDV感染后JNK细胞定位

5.1.7 转染方法

5.2 实验结果

5.2.1 NDV感染激活JNK

5.2.2 NDV感染通过激活IRE1α调控JNK信号通路

5.2.3 NF-κB通路调控JNK活化

5.2.4 JNK促进NDV感染诱导的细胞凋亡

5 .3 讨论

5 .4小结

第六章 全文结论

参考文献

致谢

作者简历