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论文说明:英文缩略表
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第一章文献综述
1.1蛋白激发子
1.1.1过敏蛋白Harpin
1.1.2激发素Elicitin
1.1.3激活蛋白Activator Protein
1.1.4无毒蛋白
1.1.5病毒激发子
1.2转基因水稻
1.2.1水稻转基因方法
1.2.2水稻遗传转化中所用的外植体
1.2.3水稻遗传转化中所用的培养基
1.2.4水稻遗传转化中所用的目的基因
1.2.5转基因水稻现存的问题和对策
1.3转基因烟草
1.3.1烟草转基因研究的意义
1.3.2外源基因导入烟草的方法
1.3.3烟草抗TMV基因工程策略
1.4转化子的筛选方法
1.4.1用报告基因进行筛选
1.4.2用选择标记基因进行筛选
1.5转基因植物的检测方法
1.5.1外源基因整合水平的检测
1.5.2外源基因转录水平的检测
1.5.3外源基因表达水平的检测
1.5.4其它检测技术
1.6转基因植物中外源基因的遗传稳定性
1.7转基因植物的安全性
1.7.1转基因植物对生物安全的影响
1.7.2提高转基因植物安全性的策略
1.8研究背景和意义
1.9试验设计
第二章 稻瘟菌激活蛋白基因pemG1植物表达载体的构建
2.1材料和方法
2.1.1 材料
2.1.2主要试剂和药品
2.1.3转化水稻的植物表达载体的构建
2.1.4转化烟草的植物表达载体的构建
2.1.5植物表达载体转化根癌农杆菌
2.2结果与分析
2.2.1植物表达载体的酶切和测序检测
2.2.2根癌农杆菌中植物表达载体的检测
2.3讨论
2.4小结
第三章转pemG1基因植株的获得
3.1材料和方法
3.1.1主要试剂和药品
3.1.2转pemG1基因日本晴的获得
3.1.3转pemG1基因普通烟和三生烟的获得
3.2结果与分析
3.2.1不同培养基在组织培养中的效果及转基因日本晴的获得
3.2.2转基因普通烟和三生烟的获得
3.3讨论
3.3.1水稻组织培养培养基
3.3.2籼稻的组织培养
3.3.3筛选标记基因
3.3.4关于水稻转基因的方法
3.4小结
第四章转pemG1基因植株的分子检测
4.1材料和方法
4.1.1主要试剂和药品
4.1.2主要溶液的配制
4.1.3主要仪器设备
4.1.4转基因植株的PCR检测
4.1.5转基因植株的Southem blot检测
4.1.6转基因植株的RT-PCR及Northern blot鉴定
4.1.7转基因植株的Western blot鉴定
4.1.8转基因后代的遗传分析及纯合阳性株系的筛选
4.2结果与分析
4.2.1转基因水稻的分子鉴定
4.2.2转基因烟草的分子鉴定
4.2.3转基因后代的遗传分析
4.2.4纯合转基因株系的筛选
4.3讨论
4.3.1关于转基因植物的分子检测方法
4.3.2关于纯合转基因株系的筛选
4.4小结
第五章转pemG1基因植株的抗病性和农艺性状
5.1材料和方法
5.1.1转基因水稻的稻瘟病抗性鉴定
5.1.2转基因水稻的农艺性状观察
5.1.3转基因三生烟的TMV抗性鉴定和mRNA检测
5.2结果与分析
5.2.1转基因水稻对稻瘟病的抗性
5.2.2转基因水稻的生长性状
5.2.3转基因三生烟对TMV的抗性
5.2.4 pemG1基因mRNA积累水平与对TMV抗性的相关性分析
5.3讨论
5.3.1稻瘟菌激活蛋白基因在水稻和烟草中的表达提高了转基因植株抗病性
5.3.2稻瘟菌激活蛋白基因在水稻中的表达促进了水稻生长
5.3.3转基因植物抗病性的稳定遗传
5.3.4双拷贝转化子的后代用于抗病性试验的可行性
5.3.5 PemG1蛋白诱导抗病性的机制
5.3.6蛋白激发子应用前景分析
5.4小结
第六章结论
参考文献
致谢
作者简历
中国农业科学院;