补肾强督方对强直性脊柱炎（大（尢娄））患者骨破坏相关因子影响的研究

摘要

目的：从中医角度探讨强直性脊柱炎(AnkylosingSpondylitisAS)的发病因素和病因病机，寻求合理的辨证论治方案，评估补肾强督方治疗强直性脊柱炎肾虚督寒血瘀证的疗效和安全性。同时探讨细胞因子和基质金属蛋白酶在强直性脊柱炎炎性骨破坏中的作用，研究补肾强督方防治强直性脊柱炎炎性骨破坏的可能作用机理。 方法：从文献综述和理论探讨两方面探讨强直性脊柱炎(AS)的发病因素、证候特征和治疗大法。临床研究部分，选择强直性脊柱炎肾虚督寒血瘀患者，分为补肾强督方治疗组和尪痹冲剂加白芍总苷对照组，观察两组患者临床症状、证候积分、体征、实验室检查的变化，计算两组显效率、有效率和总有效率，并观察药物的副作用，探讨补肾强督方的作用机理。实验研究部分，选择活动期强直性脊柱炎肾虚督寒血瘀证患者和服用补肾强督方病情缓解者为研究对象，并设健康对照组，常规分离外周血单个核细胞(PBMC)，经细胞刺激实验观察患者治疗前组与健康对照组相比PBMC分泌细胞因子TNF-α、TGF-β1和基质金属蛋白酶MMP9、基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP1的潜能的差异，研究AS患者PBMC的活化状态，以及细胞因子和基质金属蛋白酶在AS患者炎性骨破坏中的作用；通过比较患者治疗后组和治疗前组PBMC分泌细胞因子和基质金属蛋白酶潜能的差异，研究补肾强督方防治AS炎性骨破坏的可能作用靶点。 结果：通过查阅文献和中医经典著作，结合导师治疗强直性脊柱炎的经验和学术思想，研究结果提示体质因素在强直性脊柱炎发病中起着重要作用，并制约着强直性脊柱炎的证候变化规律和治疗转归；肾虚督寒血瘀证是强直性脊柱炎的主要证候特征，补肾强督法是强直性脊柱炎的治疗大法，活血化瘀通络贯穿治疗强直性脊柱炎的始终；从循经辨证来分型论治强直性脊柱炎更便于临床把握运用。临床研究部分结果显示，补肾强督方和尪痹冲剂加白芍总苷对照组两组患者治疗前后全身疼痛、脊柱疼痛、夜间疼痛、晨僵时间、畏寒喜暖、乏力和血瘀证积分均有明显下降；两组患者指地距、胸廓活动度、schober试验、脊柱活动度和4字试验治疗前后均有明显改善；两组ESR、CRP、单核细胞计数、血小板计数、IgA和IgG治疗前后均有明显改善；各项指标在补肾强督方治疗组和尪痹冲剂加白芍总苷对照组相比无显著性差异；补肾强督方治疗AS显效率为30％，，有效率为56.67％，总有效率为86.67％，且安全无明显毒副作用。 实验研究结果显示，AS患者的PBMC在刺激实验4小时时间点较正常人PBMC具有明显的聚集性，细胞聚集成团块状；分析刺激后PBMCs产生的细胞因子发现：与健康对照组相比，患者治疗前组PBMCs分泌TNF-α的量显著升高，而且TNF-αmRNA的表达上调，患者治疗后组较治疗前组分泌TNF-α的量和TNF-αmRNA的表达均显著下降；另外，与健康对照组相比，患者治疗前组PBMCs分泌TGF-β1的量显著下降，而且TGF-β1mRNA的表达下调，但是，TGF-β1的表达在患者治疗后组和治疗前组相比无显著差异。细胞因子与疾病的相关性分析显示：患者治疗前组CRP与TNF-α呈正相关，ESR与TGF-β1呈负相关。对刺激后PBMCs产生的基质金属蛋白酶及其抑制剂的分析显示：患者治疗前组与健康对照组相比，PBMCs分泌的MMP9和TIMP1均显著升高，而患者治疗后组与治疗前组相比，PBMCs分泌MMP9和TIMP1均显著下降；在转录水平，与健康对照组相比，患者治疗前组PBMCs的TIMP1mRNA表达明显上调，患者治疗后组与治疗前组相比PBMCs的TIMP1mRNA表达明显下调。相关性分析显示：患者治疗前组MMP9与IgA呈显著相关性，TIMP1与CRP、单核细胞计数和PLT均呈显著相关性。 结论：补肾强督方能显著减轻AS患者的症状，降低炎性指标，具有明显的抗炎和活血化瘀作用以及一定的免疫调节作用，总有效率高，且安全无明显毒副作用。AS患者体内外周血单个核细胞处于活化状态，对刺激的反应迅速，表达和释放细胞因子和基质金属蛋白酶的潜能异常，并且细胞因子和基质金属蛋白酶及其酶抑制剂水平的变化与疾病相关。补肾强督方通过改善AS患者外周血单个核细胞释放细胞因子和基质金属蛋白酶能力的异常，从而发挥抗炎性骨破坏的作用。

目录

英文缩略词表

第一部分文献与理论研究

第二部分补肾强督方治疗强直性脊柱炎肾虚督寒血瘀证的疗效和安全性评估

第三部分补肾强督方对强直性脊柱炎(大(尢娄))患者骨破坏相关因子影响的实验研究

前言

实验一、补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞细胞因子的影响

实验二、补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞基质金属蛋白酶的影响

结语

致谢

个人简历