丹参枳术饮对大鼠肠动力机制的实验研究

摘要

目的： 观察“丹参枳术饮”对ICR小鼠的急性毒理反应，对SD大鼠的慢性毒理反应，及建立大鼠的慢传输便秘模型，从神经病理方面了解“丹参枳术饮”治疗大鼠STC的研究，评价“丹参枳术饮”的安全性能及其治疗STC的疗效，为将丹参枳术饮开发成促肠动力药展示良好发展前景。 方法： 1．急性毒理实验： 通过预试验，得不出半数致死量LD50后，测最大给药量。取40只ICR小鼠，随机分为对照组和“丹参枳术饮”组，实验前禁食不禁水12h，“丹参枳术饮”组按每次257g/kg给小鼠灌胃，连续2次，每次间隔5h。相当于临床用量的308倍（成人60kg，用量100g/d）。对照组给予生理盐水灌胃，方法、剂量同“丹参枳术饮”组。连续观察7天，观察其外观、行为、活动、毛色、大小便、进食、饮水、体重变化；及取心、肝、脾、肺、肾脏器做病理学检查。 2．慢性毒理实验： SD大鼠40只，随机将动物分配为4组，每组10只，丹参枳术饮灌胃的有3组，分别为高剂量组25g/kg，中剂量组12．5g/kg，和低剂量6．25g/kg；对照组10只，给予等量的蒸馏水灌胃，每周称体重1次，给药量按体重改变。每天灌胃1次，总共4周。最后1次给药后24小时，处死大鼠，断头取血，测大鼠血常规、肝功能、肾功能、血糖、血脂。并取心、肝、肾、脾、肺等脏器称重，计算脏器系数（占体重%）。同时取上述脏器作病理组织学检查。 3．健康成年SD大鼠30只，按照随机化原则分为正常组10只，模型组20只（其中模型亚组10只，治疗亚组10只）。运用泻药法（大黄粉）复制大鼠慢传输型便秘的动物模型。正常组、模型亚组予生理盐水，以20ml/kg灌胃给药。治疗亚组予丹参枳术饮，以生药10．5g/kg灌胃给药。每同一次，15天为1疗程。取大鼠大肠（盲肠至肛门上方2cm），石蜡包埋，制作常规HE染色和免疫组化染色。 结果： 1．给药后动物在7天内生长良好，外观、行为、活动、毛色、大小便未见异常。进食、饮水、体重变化在各个时间段内，“丹参枳术饮”组和正常组相比较，两者有显著性差异。 2．用药组和对照组在4周的实验期内均活动正常，无异常行为，摄食及二便基本正常。对大鼠体重的影响，每周的各组与对照组相比较，P值均大于0．05，对大鼠血常规的影响，结果表明丹参枳术饮对大鼠血常规无明显影响，P值大于0．05。对大鼠肝、肾功能、血糖、血脂的影响，结果表明丹参枳术饮对大鼠在肝肾功能、血糖、血脂无明显影响，P值大于0．05。对大鼠主要脏器系数的影响，结果表明丹参枳术饮灌胃对大鼠的脏器系数无明显影响，P值大于0．05。组织学检查：心脏、肝脏、脾脏、肾脏基本无明显的病理改变。 3．运用泻药法成功地复制了大鼠慢传输型便秘的动物模型，常规HE染色结果表明：对照组未发现粘膜下层及肌间神经丛病变。模型组便秘大鼠结肠肌间神经细胞排列紊乱，聚集成堆，分布不均，呈不规则形，神经细胞有空泡样变性，神经节数目变少。可见有炎症细胞浸润，淋巴滤泡增多等。治疗组可见粘膜慢性炎症减轻，肌间神经丛结构有所恢复，神经节数目增多，排列较整齐。 4．NOS免疫组化染色结果显示：对照组与模型组比较，P<0．01，提示对照组的NOS阳性的神经元细胞少，差异显著；治疗组与模型组比较，P<0．05，提示治疗后，NOS阳性的神经元细胞减少；对照组与治疗组比较，P>0．05，没有差异。 结论： 1．“丹参枳术饮”是一种安全可靠、低毒的中药方剂。 2．“丹参枳术饮”可以减少STC大鼠的肠道肌间神经丛内NOS阳性表达，从而达到调控肠道平滑肌的收缩的目的。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词

声明

引 言

第一部分急性毒理实验

1.材料和方法

2.结 果

第二部分慢性毒理实验

1.材料和方法

2.结 果

3.讨 论

第三部分结肠肌间神经丛病理变化和NOS免疫组化研究

1.材料和方法

2.实验结果

3.讨 论

小 结

参考文献

附 录：

致谢

综 述：一氧化氮与结肠慢性传输型便秘