FSA硬性角膜接触镜表面沉淀物及表面改性研究

摘要

目的：
　　 角膜接触镜主要用途是矫正视力。研究指出,要满足无角膜水肿的日戴要求,DK/t值必须大于24banrrers/mm；过夜配戴时,DK/t必须大于87,但存在4％的角膜水肿；只有当DK/t大于125时,才能保证延长配戴时无因缺氧引起的相关症状。消费者都有“自然视觉的追求”,迫切需求适合过夜或延长配戴的角膜接触镜。可以连续配戴7d、30d或者更长时间的接触镜,能减少日戴所带来的麻烦,降低发生眼部疾病的危险性。Cornea and Contact Lens Research Unit调查结果显示97％的消费者希望可以连续配戴接触镜每7d至少6个晚上,85％的消费者在选择接触镜时会考虑是否适合延长配戴。因此,高透氧性角膜接触镜有很大的市场。透氧能力是决定镜片是适合日戴还是延长配戴的首要因素。FSA透氧性高,硬度介于硬镜与软镜之间,0.10～0.15mm厚度,疏水,适应期较SCL长。其表面易于形成脂质与蛋白质沉淀。
　　 角膜接触镜上的沉淀物是由蛋白质、脂质、钙盐、微生物、色素等构成的,已被人们公认为是引起戴镜并发症的重要因为。在实际戴用中需要定期更换。临床上有时要对镜片上的沉淀物进行检测,从而为戴用者提供合理的更换建议,并指导正确的验配和戴用。本研究分别采用BCA法、HPLC-ELSD法、FAAS法对FSA镜片表面吸附的溶菌酶、磷脂酰胆碱、钙盐进行了测定,摸索出适用于FSA硬镜的三种方法的最优条件。在充分了解三种物质在FSA硬镜表面短期沉积动力学的基础上,尝试对FSA硬镜进行等离子体表面改性并进行改性后的评估,为降低FSA硬镜表面沉淀物提供有效方法。
　　 方法：
　　 1.将FSA硬镜放入24孔细胞培养板孔中,每孔加入2 mL2.0 g/L溶菌酶溶液,37℃振荡孵育2 h,后用Hank’s平衡盐溶液清洗,然后将镜片浸入0.2％三氟乙酸中室温放置2 h。BCA法检测清洗FSA硬镜后Hank’s平衡盐溶液,0.2％三氟乙酸溶液,取出FSA硬镜后24孔培养板每孔溶液中溶菌酶含量。计算FSA硬镜溶菌酶吸附量。
　　 2.将FSA硬镜放入24孔细胞培养板孔中,每孔加入2 mL14.2μg/ml磷脂酰胆碱母液,37℃振荡孵育,孵育时间5h,后用乙腈-甲醇溶液清洗,然后将FSA镜片浸入乙腈-甲醇溶液中室温放置10min；HPLC-ELSD法测清洗FSA硬镜后乙腈-甲醇溶液,浸泡过FSA硬镜后乙腈-甲醇溶液,取出FSA硬镜后24孔培养板每孔溶液中磷脂酰胆碱的含量。计算FSA硬镜磷脂酰胆碱吸附量。
　　 3.将FSA硬镜放入24孔细胞培养板孔中,每孔加入含有(72μg/ml氯化钙+2.0g/L溶菌酶+14.2μg/ml磷脂酰胆碱)的Hank’s平衡盐溶液,37℃振荡孵育,孵育3h,后将镜片烘干、称重。烘干的镜片称重后放入坩埚中,称取坩埚与镜片的质量。将镜片放入坩埚在立式电路上预烧,直到镜片不再冒烟为止,预烧后的镜片随即放入马弗炉中,800℃烧3h,后冷却至室温。将高温烧后镜片残留物移入5ml细胞培养管中,取10μl三氟乙酸溶解残留物,后用超纯水定容至5ml,后用火焰原子分光光度计进行检测。计算FSA硬镜钙离子吸附量。
　　 4.FSA硬镜经低温等离子体处理后,采用上述方法分别测定FSA硬镜溶菌酶吸附量、磷脂酰胆碱吸附量、钙离子吸附量。
　　 结果：
　　 (1)FSA硬镜表面吸附溶菌酶趋势:FSA硬镜吸附溶菌酶,吸附时间为10 min～1 h时,吸附量递增；吸附时间为1～24h时,FSA硬镜吸附溶菌酶的量稳定。
　　 (2)FSA硬镜对磷脂酰胆碱的吸附,当吸附时间<5 h时,吸附量随时间逐渐增加,于5 h吸附饱和,5～24 h达吸附稳定状态。
　　 (3)FSA硬镜体外吸附钙离子10 min～2 h时,吸附量明显增加；吸附时间为2～24 h吸附量变化不明显。
　　 (4)采用O2等离子体处理对FSA硬镜表面进行改性,可使FSA硬镜对溶菌酶、磷脂酰胆碱、钙离子吸附均减少。