MPTP造模PD小鼠认知和情感的长时程变化及机制

摘要

[目的]：
　　1.观察神经毒素1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP)亚急性PD造模小鼠学习记忆障碍和抑郁症状;
　　2.观察PD小鼠学习记忆障碍和抑郁症状是否随PD造模后时间的延长而改变;
　　3.观察PD小鼠学习记忆障碍和抑郁症状改变是否与黑质纹状体病理改变平行;
　　[方法]：
　　1.选用60只8周龄雄性C57BL/6小鼠(20-30g)随机分成3组:造模后1周组、造模后3周组和造模后5周组，每一组又分为10只MPTP给药组和10只空白对照组。
　　2.30只MPTP给药小鼠以MPTP连续腹腔注射7天，每天1次，每次30mg/kg;30只空白对照小鼠以等量生理盐水腹腔注射。
　　3.造模后1周组、造模后3周组和造模后5周组分别在MPTP造模后1周、3周和5周用悬尾实验检测PD小鼠的抑郁症状，用Morris水迷宫实验检测PD小鼠的空间学习记忆能力。
　　4.测验结束后麻醉小鼠断头取脑，分别分离纹状体、海马、中脑和前额叶皮质，用HPLC技术检测纹状体、海马和前额叶皮质中的多巴胺、5-羟色胺的变化。中脑用于观察黑质的酪氨酸羟化酶。
　　[结果]：
　　1.行为学观察结果:与对照组比较，实验组小鼠的水迷宫潜伏期没有明显差异(p＞0.05)，悬尾实验小鼠的静止时间无统计学差异（p＞0.05）。
　　2.SP免疫组织化学法结果:实验组小鼠中脑黑质部TH免疫组织化学染色阳性细胞数明显减少，阳性细胞数(CPC)较对照组均有显著差异（p＜0.05）。各实验组之间细胞减少无统计学差异（p＞0.05）。
　　3.神经递质检测中，与对照组比较，各实验组纹状体中的DA有显著的降低（p＜0.05），而且随着时间的延长进行性下降;前额叶皮质中的DA在三周龄和五周龄实验组小鼠比对照组有显著降低（p＜0.05）;海马中DA各组间无明显差异(p＞0.05)。5-TH在实验组的纹状体中较对照组有显著下降（p＜0.05），但在海马和前额叶中与对照组比较统计学差异（p＞0.05）。
　　[结论]：
　　1.对C57BL/6小鼠亚急性使用MPTP可以成功制作PD动物模型，并且这种模型可以在较长时间内保持稳定;
　　2.亚急性PD小鼠随着病程的延长，黑质纹状体中的DA系统会出现进行性损害;
　　3.MPTP造模在损害黑质纹状体DA系统外，还会损害前额叶皮层的DA系统，但对海马的DA系统影响较小;
　　4.MPTP在损害DA系统外还会损害纹状体中的5-HT系统，但对海马和前额叶皮层的5-HT系统影响较小;
　　5.MPTP亚急性造模小鼠没有明显空间参考记忆和情感障碍。

目录

缩略词表

摘要

前言

材料和方法

一、实验动物

二、主要仪器及试剂

三、动物分组和PD小鼠模型制备

四、行为学实验

五、取材及切片制作

六、TH免疫组化步骤

七、高效液相技术

八、统计学处理

结果

一、行为学结果

二、神经递质检测

三、免疫组化结果

分析与讨论

1．MPTP所致小鼠PD模型的制作和评价

2．PD小鼠认知及情感变化及其可能机制

结论

参考文献

个人资料

致谢

综述 帕金森病认知功能障碍

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