骨形成蛋白7对肝纤维化中E3泛素连接酶表达的干预研究

摘要

目的： 探索E3泛素连接酶Arkadia在四氯化碳致小鼠肝纤维化中的动态表达，以及BMP7对其阻断作用。 方法： 30只健康雄性ICR小鼠，随机分为正常对照组(6只)、模型组(18只)和BMP7干预组(6只)；模型组再按不同的时间点分为4周、8周、12周3个亚组。在小鼠双后肢皮下交替注射60%四氯化碳/花生油溶液(5ml/Kg)，每周2次，共持续12周，制备肝纤维化模型；BMP7干预组在皮下注射四氯化碳的同时，从第9周始腹腔注射骨形成蛋白7(300pg/g)溶液，隔天一次，共4周。苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察肝组织病理变化；用反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)，免疫组化和免疫印记(western blotting)法检测肝组织中Arkadia信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达。 结果： 成功建立了肝纤维化模型。模型组Arkadia mRNA的表达量在纤维化过程中逐渐升高，BMP-7干预组其表达量又降低，与对照组相比，差异有统计学意义(F=812.801，P<0.01)；与模型组12w相比，BMP-7干预组Arkadia mRNA的表达量明显降低，差异有统计学意义(t=12.108，P<0.01)。正常肝组织中Arkadia蛋白仅在汇管区少量表达，模型组中其表达量逐渐增加，主要在汇管区和肝细胞胞质内表达，BMP-7干预后其表达量又降低，与对照组相比，差异有统计学意义(F=8.399，P<0.01)；与模型组12w相比，BMP-7干预组Arkadia蛋白表达量显著降低，差异有统计学意义(t=23.438，P<0.01)。 结论： Arkadia在肝纤维化进展过程中呈上升趋势，BMP-7具有抗肝纤维化作用并可以抑制纤维化过程中Arkadia的表达。